miR-144靶向NF-κB受體活化因子配體蛋白調(diào)控樹(shù)突狀細(xì)胞分泌細(xì)胞因子
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【摘要】:目的探討miRNA-144對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)成熟過(guò)程中細(xì)胞因子分泌的影響及機(jī)制。方法通過(guò)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室前期工作中獲得的DCs成熟過(guò)程中miRNA芯片結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘,篩選得到DCs成熟過(guò)程中顯著下調(diào)的miRNA(miR)-144,并使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激體外培養(yǎng)的DCs進(jìn)行驗(yàn)證;檢測(cè)miR-144轉(zhuǎn)染DCs后相關(guān)細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-23)的改變及信號(hào)通路(NF-κB、MAPK)活化情況;使用TargetScan預(yù)測(cè)miR-144的作用靶點(diǎn)并通過(guò)雙熒光報(bào)告系統(tǒng)驗(yàn)證;進(jìn)一步構(gòu)建靶蛋白過(guò)表達(dá)DC2.4細(xì)胞系并檢測(cè)miR-144擬似物轉(zhuǎn)染該細(xì)胞系后細(xì)胞因子TNF-αmRNA的分泌情況。結(jié)果體外培養(yǎng)的DCs經(jīng)LPS刺激成熟后miR-144的表達(dá)下調(diào)(P0.01)。miR-144擬似物轉(zhuǎn)染DCs后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-23mRNA表達(dá)均出現(xiàn)下調(diào)(P0.05,P0.01),NF-κB磷酸化水平下降。通過(guò)信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)miR-144的潛在靶點(diǎn)為NF-κB受體活化因子配體蛋白基因(RANKL)并通過(guò)雙熒光報(bào)告系統(tǒng)證明了該結(jié)論。在RANKL過(guò)表達(dá)DC2.4細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染miR-144擬似物后,TNF-αmRNA的表達(dá)不受影響。結(jié)論 miR-144靶向RANKL調(diào)控DCs細(xì)胞因子分泌。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院器官移植科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81270551) 上海市科委國(guó)際合作課題(11410708700)~~
【分類號(hào)】:R392.4
【正文快照】: 抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cells,APCs)是連接抗原和淋巴細(xì)胞的橋梁,而樹(shù)突狀細(xì)胞(den-dritic cells,DCs)作為專職抗原提呈細(xì)胞,具有強(qiáng)大的捕獲、加工和提呈抗原功能,并能夠刺激初始T細(xì)胞增殖和T細(xì)胞依賴性抗體的形成,在感染、腫瘤、自身免疫及移植等免疫相關(guān)性疾病的
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條
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2 尚永軍;崔其福;李金龍;郭國(guó)寧;;B7-H3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織內(nèi)的表達(dá)及分布研究[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2012年03期
3 尚永軍;崔其福;李金龍;郭國(guó)寧;朱文宴;;B和T淋巴細(xì)胞衰減因子(BTLA)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜組織的表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年06期
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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1158557
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