Sjcb2 DNA疫苗在血吸蟲感染小鼠中的保護(hù)性作用研究
發(fā)布時間:2017-11-04 18:26
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【摘要】:目的研究Sjcb2DNA疫苗在日本血吸蟲病小鼠模型中的保護(hù)性作用和機(jī)制,為血吸蟲疫苗的研究提供有效的候選抗原分子。方法構(gòu)建pcDNA3.1(+)/Sjcb2核酸疫苗,將6周齡雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為pcDNA3.1(+)/Sjcb2核酸疫苗組、pcDNA3.1(+)空質(zhì)粒組及生理鹽水組,每組35只,采用后腿股四頭肌注射方法,每次免疫質(zhì)粒DNA 100μg,每2周免疫1次,共免疫3次,用日本血吸蟲尾蚴攻擊感染各組小鼠。PCR及免疫組化法檢測Sjcb2基因在小鼠體內(nèi)的穩(wěn)定性及表達(dá)情況;MTT法檢測小鼠脾淋巴細(xì)胞特異性增殖反應(yīng);ELISA法檢測小鼠血清中Sjcb2抗體水平及攻擊感染前后脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ和IL-4的水平;計數(shù)小鼠荷成蟲對數(shù)和肝臟荷蟲卵數(shù)。結(jié)果疫苗組小鼠均可在小鼠肌細(xì)胞中檢測到Sjcb2基因及其抗原的表達(dá);DNA疫苗組T細(xì)胞增殖顯著增高(P0.05);ELISA結(jié)果顯示疫苗組IFN-γ水平顯著增高(P0.05),血吸蟲尾蚴攻擊感染后各組小鼠IL-4水平顯著升高(P0.05)。DNA疫苗組小鼠荷成蟲對數(shù)及肝臟荷蟲卵數(shù)與其它組比較顯著性減少(P0.05),其減蟲率為36.32%,減卵率為60.61%。結(jié)論 Sjcb2DNA疫苗接種小鼠后能在小鼠肌細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達(dá);Sjcb2可能通過提高IFN-γ和降低IL-4水平調(diào)節(jié)Th1細(xì)胞亞群產(chǎn)生抗血吸蟲感染的保護(hù)性作用。
【作者單位】: 南華大學(xué)病原生物學(xué)研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.30972576) 湖南省自然科學(xué)衡陽聯(lián)合基金(No.11JJ9022) 特殊病原體防控湖南省重點實驗室資助(2014-5)和(2012-312)~~
【分類號】:R392
【正文快照】: 日本血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人體健康的人獸共患病,目前尚無有效的疫苗控制疾病的傳播,研制有效的疫苗及尋找有效的疫苗候選分子成為血吸蟲病研究的重點與熱點[1-2]。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)及免疫學(xué)的發(fā)展,血吸蟲病疫苗已由滅活疫苗、減毒活疫苗和基因工程重組蛋白疫苗發(fā)展到核酸,
本文編號:1140625
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