本文關(guān)鍵詞：雙分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)分析S-periaxin蛋白的聚合

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【摘要】：S-periaxin蛋白是施旺氏細(xì)胞特異性表達(dá)的一種蛋白,在維持髓鞘的穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用,該蛋白基因的突變引起腓骨肌萎縮癥4F亞型的發(fā)生。Periaxin基因由于mRNA剪切方式的不同可以編碼兩種長短不同的含PDZ結(jié)構(gòu)域的蛋白,即L-periaxin和S-periaxin。兩種蛋白在施旺氏細(xì)胞的定位存在明顯的差異,相對L-periaxin而言,S-periaxin無論是分子結(jié)構(gòu)還是生物學(xué)功能均未見相關(guān)研究。該文從大鼠的施旺氏細(xì)胞系RSC96克隆了S-periaxin基因,構(gòu)建了原核表達(dá)載體pETM-3C-S-periaxin,在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá),經(jīng)Ni-NTA親和柱和Sephacryl S-200凝膠層析柱獲得電泳純的目的蛋白。體外戊二醛交聯(lián)分析蛋白的聚合狀態(tài)表明,S-periaxin蛋白在體外易于形成不同聚合度的聚合物。免疫共沉淀也表明,S-periaxin蛋白存在同源蛋白間相互作用。另外,構(gòu)建了原、真核雙分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng),并利用該系統(tǒng)分析了細(xì)胞內(nèi)S-periaxin蛋白間的相互作用。
【作者單位】： 化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 山西大學(xué)生物技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】： periaxin 施旺氏細(xì)胞 戊二醛交聯(lián) 免疫共沉淀 雙分子熒光互補(bǔ)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:31170748)資助的課題~~
【分類號】：R3416
【正文快照】： 髓鞘是包裹在軸突外面的一層膜,其作用是保護(hù)神經(jīng)元并使神經(jīng)沖動在神經(jīng)元上得到快速傳遞。在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中,成串排列的施旺細(xì)胞以1:1的關(guān)系呈螺旋狀包裹軸突,形成類似同心圓板層“髓鞘”。成熟的髓鞘由蛋白質(zhì)和脂類組成,目前已經(jīng)鑒定了小鼠坐骨神經(jīng)髓鞘的545種蛋白,其中P0、p，

本文編號：1120382