本文關(guān)鍵詞：不同工藝制備的E型肉毒毒素及其類(lèi)毒素的免疫原性分析

  更多相關(guān)文章： E型肉毒毒素 菌體提取 酸沉淀 類(lèi)毒素 免疫原性

【摘要】：目的用不同工藝制備E型肉毒毒素,脫毒制備類(lèi)毒素,并分析其免疫原性。方法分別用菌體內(nèi)提取法和酸沉淀法制備E型肉毒毒素,進(jìn)行毒素型特異性檢定及毒力測(cè)定后,脫毒制備類(lèi)毒素,參考《中國(guó)藥典》三部(2010版)進(jìn)行結(jié)合價(jià)、蛋白氮(PN)含量、總氮(TN)含量、p H測(cè)定及脫毒檢查和毒性逆轉(zhuǎn)試驗(yàn)。選擇結(jié)合價(jià)較高的2批類(lèi)毒素配制3組抗原,經(jīng)家兔皮下進(jìn)行基礎(chǔ)免疫(共2針)和3程超免疫(2針/程),每針間隔14 d,每程免疫間隔30 d,均于第2針免疫后第20天,經(jīng)耳緣靜脈采血,分離血清,參考《中國(guó)藥典》三部(2010版)附錄ⅪH肉毒抗毒素效價(jià)檢測(cè)法,檢測(cè)抗體效價(jià)。結(jié)果 55、120 h菌體內(nèi)提取毒素(201112001和201112003批)及55、120 h酸沉淀提取毒素(201112002和201112004批)均為E型肉毒毒素,毒力分別為6.2×103、5.0×102、4.5×102、6.5×103 LD50/ml;各組類(lèi)毒素脫毒檢查和毒性逆轉(zhuǎn)試驗(yàn)結(jié)果均符合《中國(guó)藥典》三部(2010版)規(guī)定,55 h酸沉淀提取毒素其類(lèi)毒素TN、PN含量最高,120 h菌體內(nèi)提取毒素最低。制備的3組抗原(201112001-1、201112004-1及201112004-2批)抗原結(jié)合價(jià)分別為900、2 100和900 BU/ml;兩種方法制備的類(lèi)毒素按最高結(jié)合價(jià)配制抗原,免疫后的血清效價(jià)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),兩種方法制備的類(lèi)毒素按相同結(jié)合價(jià)配制抗原及同批類(lèi)毒素配制的不同結(jié)合價(jià)抗原,免疫后的血清效價(jià)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論用酸沉淀法從120 h培養(yǎng)液中提取毒素可獲得與55 h菌體內(nèi)提取毒素相同免疫原性的類(lèi)毒素。酸沉淀法操作簡(jiǎn)便,更適宜馬匹免疫用E型肉毒抗原的規(guī)�；a(chǎn)。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司血清室;
【關(guān)鍵詞】： E型肉毒毒素 菌體提取 酸沉淀 類(lèi)毒素 免疫原性
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： 肉毒毒素(botulinum toxin)是由厭氧的肉毒梭菌(Clostridium botulinum)在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中產(chǎn)生的一種細(xì)菌外毒素,其能引起死亡率極高的肉毒中毒。肉毒梭菌及其毒素根據(jù)毒素抗原性的不同,可分為A、B、C、D、E、F和G 7個(gè)型。其中A、B、E、F為人中毒型別,C、D為動(dòng)物和家禽的中毒型

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