發(fā)布時間：2017-10-26 17:28

  本文關(guān)鍵詞：天然免疫分子LILRB5慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染THP-1細(xì)胞系的構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： 綠色熒光蛋白 LILRB 單核細(xì)胞 慢病毒 轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的構(gòu)建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表達載體,獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LILRB5的單核細(xì)胞系。方法將LILRB5構(gòu)建入真核表達載體pEGFP-flag,瞬時轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞系,通過免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)檢測LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T細(xì)胞中的表達。構(gòu)建慢病毒表達載體pHR-LILRB5,與p8.91和pMD共同轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,產(chǎn)生標(biāo)記有綠色熒光的LILRB5慢病毒,感染單核細(xì)胞系THP-1后通過流式細(xì)胞術(shù)檢測LILRB5的表達。結(jié)果測序顯示真核表達載體pEGFP-LILRB5-flag的序列與預(yù)期相符,瞬時轉(zhuǎn)染pEGFP-LILRB5-flag的293T細(xì)胞可檢測到綠色熒光蛋白的表達,流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示LILRB5-flag在細(xì)胞膜表面有表達;構(gòu)建亞克隆慢病毒載體pHR-LILRB5,經(jīng)測序驗證后,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,產(chǎn)生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測LILRB5在THP-1細(xì)胞穩(wěn)定表達。結(jié)論構(gòu)建LILRB5的慢病毒載體,通過LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的穩(wěn)轉(zhuǎn)THP-1細(xì)胞系。
【作者單位】： 濟南大學(xué)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 綠色熒光蛋白 LILRB 單核細(xì)胞 慢病毒 轉(zhuǎn)染
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.81101605,81172792) 山東省自然科學(xué)基金項目(No.ZR2010HQ034,ZR2009CL014) 山東省科技發(fā)展計劃項目(No.2010GSF10210) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃項目(No.2011QZ021) 山東省優(yōu)秀中青年科學(xué)家科研獎勵基金項目(No.BS2009YY008)
【分類號】：R373
【正文快照】： ***白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體B5(leukocyte immuno-globulin-like receptor B5,LilrB5),又稱白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8(leukocyte immunoglobulinlikereceptor8)、CD85c,是NK受體(一組緊密連鎖的基因群)成員之一。NK細(xì)胞受體主要包括3個家族成員,它們分別是KIRs受體家族,KLRs受體

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 姜昱竹;胡雪梅;;sHLA-G與母胎免疫耐受[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2013年05期

2 宇小婷;謝莉;占蒙娜;鄭俊克;于卓;;免疫抑制性受體LILRB2對白血病細(xì)胞系增殖和凋亡的影響[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年07期

3 李坤;潘云燕;延俊元;楊香山;牛洪欣;;ILT4基因在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其功能初步研究[J];中國婦幼保健;2014年07期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳俊;可溶性HLA-G二聚體在“人—鼠”異種移植物抗宿主病模型中的作用研究[D];華中科技大學(xué);2013年

2 顧龔平;BST-2結(jié)合MT1-MMP抑制MMP2活性，，阻止細(xì)胞生長與遷移的機理研究[D];南京師范大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 宋麗;NK細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中KCTD9與SHB的作用研究[D];華中科技大學(xué);2013年

2 魏冉;胃癌患者外周血單個核細(xì)胞免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄子3的表達及臨床應(yīng)用研究[D];山東大學(xué);2014年

3 王海鳳;sHLA-G在弓形蟲感染致不良妊娠結(jié)局中的作用機制研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 李麗莉;王恒j;溫博海;朱力;袁靜;馮而玲;陳梅玲;;THP-1細(xì)胞吞噬貝氏柯克斯體后的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年07期

2 王佳賀;鄭利民;鄺棟明;武林;陳佰義;;大腸桿菌對體外培養(yǎng)的THP-1細(xì)胞凋亡的影響[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2005年05期

3 石麗萍;林梅;王林;陽大慶;周細(xì)國;;瘦素對人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞殺菌活性的影響及機制[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年06期

4 林琨;齊顯龍;孫東杰;徐修禮;李春英;高天文;;不同來源痤瘡丙酸桿菌培養(yǎng)上清對THP-1細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-12的影響[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2007年04期

5 韋莉;金齊力;劉勇;夏佩瑩;;結(jié)核分枝桿菌19 kDa脂蛋白誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡的研究[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陳建斌;葛群芳;;環(huán)孢素A對THP-1細(xì)胞的增敏作用及與多藥耐藥相關(guān)蛋白-1的關(guān)系[A];第12屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

2 吳勇波;曾和松;;TWEAK對THP-1細(xì)胞中凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

3 靳昌忠;李杰;王娟;吳麗娟;方美新;吳南屏;;IL-4誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞表達DC-SIGN的信號通路研究[A];2012年浙江省醫(yī)學(xué)會肝病、感染病學(xué)學(xué)術(shù)年會暨浙江省感染科醫(yī)師學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年

4 俞娟;;載脂蛋白C3促進THP-1細(xì)胞向小鼠主動脈粘附[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

5 劉毅;孫照剛;任衛(wèi)聰;田苗;李妍;李傳友;;結(jié)核分枝桿菌誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡和死亡水平的檢測[A];中華醫(yī)學(xué)會2008年全國結(jié)核病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

6 楊昌生;王傳清;付盼;楊毅;;載脂蛋白E模擬肽對脂多糖誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞白介素-6和白介素-10表達的調(diào)節(jié)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國心血管病學(xué)大會論文匯編[C];2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 彭求賢;尖尾芋水提物抑制小鼠乳腺癌生長與誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 王穗湘;隱孢子蟲CypA蛋白對單核巨噬細(xì)胞系THP-1細(xì)胞的免疫調(diào)控作用研究[D];暨南大學(xué);2013年

2 姜慧;肺炎鏈球菌溶血素誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡涉及p38MAPK信號通路的激活[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

3 劉蓓;活化TLR4誘導(dǎo)單核細(xì)胞性白血病THP-1細(xì)胞凋亡機制的研究[D];中南大學(xué);2007年

4 徐棟花;乳酸桿菌對LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞炎癥性細(xì)胞因子釋放的調(diào)節(jié)作用及可能機制[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

5 林琨;外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫致病菌—痤瘡丙酸桿菌培養(yǎng)上清對THP-1細(xì)胞影響的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

6 秦妍妍;結(jié)核分枝桿菌誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞轉(zhuǎn)化及其相關(guān)信號傳導(dǎo)通路的研究[D];浙江大學(xué);2008年

本文編號：1099708