本文關鍵詞：天然免疫分子LILRB5慢病毒穩(wěn)定轉染THP-1細胞系的構建

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【摘要】：目的構建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表達載體,獲得穩(wěn)定轉染LILRB5的單核細胞系。方法將LILRB5構建入真核表達載體pEGFP-flag,瞬時轉染293T細胞系,通過免疫熒光和流式細胞術檢測LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T細胞中的表達。構建慢病毒表達載體pHR-LILRB5,與p8.91和pMD共同轉入293T細胞,產(chǎn)生標記有綠色熒光的LILRB5慢病毒,感染單核細胞系THP-1后通過流式細胞術檢測LILRB5的表達。結果測序顯示真核表達載體pEGFP-LILRB5-flag的序列與預期相符,瞬時轉染pEGFP-LILRB5-flag的293T細胞可檢測到綠色熒光蛋白的表達,流式細胞術檢測顯示LILRB5-flag在細胞膜表面有表達;構建亞克隆慢病毒載體pHR-LILRB5,經(jīng)測序驗證后,轉染293T細胞,產(chǎn)生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1細胞,流式細胞術檢測LILRB5在THP-1細胞穩(wěn)定表達。結論構建LILRB5的慢病毒載體,通過LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的穩(wěn)轉THP-1細胞系。
【作者單位】： 濟南大學醫(yī)學與生命科學學院;山東省醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所;
【關鍵詞】： 綠色熒光蛋白 LILRB 單核細胞 慢病毒 轉染
【基金】：國家自然科學基金項目(No.81101605,81172792) 山東省自然科學基金項目(No.ZR2010HQ034,ZR2009CL014) 山東省科技發(fā)展計劃項目(No.2010GSF10210) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃項目(No.2011QZ021) 山東省優(yōu)秀中青年科學家科研獎勵基金項目(No.BS2009YY008)
【分類號】：R373
【正文快照】： ***白細胞免疫球蛋白樣受體B5(leukocyte immuno-globulin-like receptor B5,LilrB5),又稱白細胞免疫球蛋白樣受體8(leukocyte immunoglobulinlikereceptor8)、CD85c,是NK受體(一組緊密連鎖的基因群)成員之一。NK細胞受體主要包括3個家族成員,它們分別是KIRs受體家族,KLRs受體

【共引文獻】

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【相似文獻】

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本文編號：1099708