干擾素誘導(dǎo)蛋白Nmi與IFP35的結(jié)合區(qū)域及Nmi亞細(xì)胞定位
發(fā)布時(shí)間:2017-10-26 02:35
本文關(guān)鍵詞:干擾素誘導(dǎo)蛋白Nmi與IFP35的結(jié)合區(qū)域及Nmi亞細(xì)胞定位
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【摘要】:人源N-Myc結(jié)合蛋白(N-Myc interactor,Nmi)能在干擾素(interferon,IFN)誘導(dǎo)后高表達(dá),并參與下游的JAK-STAT通路,且有抑制癌細(xì)胞增殖的功能.Nmi能夠結(jié)合人干擾素結(jié)合蛋白35(interferon-induced protein 35,IFP35)并保護(hù)IFP35不被降解.本研究構(gòu)建了Nmi和IFP35的全長及N端截短體克隆,通過兩種蛋白的共表達(dá)和GST pull down實(shí)驗(yàn)確定二者能夠相互作用的區(qū)域,并進(jìn)一步大量共表達(dá)和純化了重組蛋白復(fù)合物.結(jié)合實(shí)驗(yàn)表明,與先前報(bào)道的兩者通過C端串聯(lián)的NID結(jié)構(gòu)域相結(jié)合不同,兩者的N端結(jié)構(gòu)域都足以介導(dǎo)復(fù)合物形成.免疫熒光觀察未經(jīng)干擾素刺激的RAW264.7細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)Nmi與IFP35共定位于細(xì)胞核內(nèi).免疫熒光觀察Nmi在293A細(xì)胞中的分布特點(diǎn),發(fā)現(xiàn)正常細(xì)胞中Nmi分布于細(xì)胞核內(nèi).如先前研究報(bào)道,干擾素誘導(dǎo)24h后,Nmi在胞質(zhì)內(nèi)形成顆粒狀聚集,此時(shí)加入低濃度過氧化氫(H2O2)會(huì)使Nmi的亞細(xì)胞定位回到細(xì)胞核內(nèi),表明Nmi的亞細(xì)胞定位受到細(xì)胞氧化環(huán)境的影響.
【作者單位】: 中國科學(xué)院生物物理研究所;中國科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: Nmi IFP 干擾素誘導(dǎo)蛋白 蛋白質(zhì)相互作用 亞細(xì)胞定位
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973)資助項(xiàng)目(2012CB910204)~~
【分類號】:R3416
【正文快照】: 干擾素(interferons,IFN)能夠通過激活數(shù)百種干擾素誘導(dǎo)蛋白和干擾素刺激基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)其抗病毒、抑制腫瘤生長及免疫調(diào)節(jié)等功能[1-2].干擾素誘導(dǎo)蛋白通常在細(xì)胞里低表達(dá)或不表達(dá),當(dāng)干擾素結(jié)合細(xì)胞表面干擾素受體時(shí),通過JAK-STAT等信號通路激活效應(yīng)蛋白的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)[3].人
【相似文獻(xiàn)】
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1 李淑蓉,粟永萍,劉曉宏,樓淑芬,程天民;干擾素誘導(dǎo)蛋白P56與糖皮質(zhì)激素受體的相互作用及對其轉(zhuǎn)錄活性的影響[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年09期
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,本文編號:1096653
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