本文關(guān)鍵詞：臍血血漿替代胎牛血清培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及冷凍保存

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【摘要】：背景:采用胎牛血清擴(kuò)增培養(yǎng)及冷凍保存的間充質(zhì)干細(xì)胞,在臨床應(yīng)用中存在一定的風(fēng)險。目的:探討以臍血血漿替代胎牛血清體外分離培養(yǎng)、擴(kuò)增及冷凍保存臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的可行性。方法:選擇符合廣州臍血庫供者合格性篩選標(biāo)準(zhǔn)的臍血,收集臍血干細(xì)胞制備過程中去除的血漿,經(jīng)病原學(xué)及微生物檢測合格,多份混合用于細(xì)胞培養(yǎng)。采用酶消化法從健康足月分娩新生兒的臍帶組織分離獲得臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,分為兩組,分別以DMEM/F12為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加胎牛血清或混合臍血血漿,經(jīng)培養(yǎng)擴(kuò)增后,采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞免疫表型,并進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞成骨、成脂分化鑒定。在含有10%二甲基亞砜的DMEM/F12培養(yǎng)基中,分別添加體積分?jǐn)?shù)為20%的胎牛血清或混合臍血血漿作為冷凍保存液,對擴(kuò)增至第3代的細(xì)胞冷凍保存至6個月以上,觀察復(fù)蘇后細(xì)胞的活率、貼壁情況、增殖、免疫表型及向成骨細(xì)胞分化的能力。結(jié)果與結(jié)論:兩種培養(yǎng)體系下的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞均呈現(xiàn)典型的梭形漩渦狀生長,間充質(zhì)干細(xì)胞免疫表型的表達(dá)譜系基本無差異,均具有成骨、成脂分化的能力,但臍血血漿培養(yǎng)條件下細(xì)胞的增殖速度顯著高于胎牛血清。凍存復(fù)蘇后的細(xì)胞可正常貼壁,且具有向成骨細(xì)胞分化的能力,采用臍血血漿凍存的細(xì)胞具有更高的貼壁效率及擴(kuò)增能力。上述結(jié)果表明,臍血血漿可以替代胎牛血清用于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)及冷凍保存,并維持了間充質(zhì)干細(xì)胞的基本生物學(xué)特性,是大量擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞用于臨床治療較為安全的選擇。
【作者單位】： 廣州市婦女兒童醫(yī)療中心 廣州臍血庫;廣州市婦女兒童醫(yī)療中心 血液內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 胎血 血漿 臍帶 間質(zhì)干細(xì)胞 冷凍 干細(xì)胞 臍帶臍血干細(xì)胞 臍血 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 體外擴(kuò)增 免疫表型 成骨分化 成脂分化 冷凍保存 復(fù)蘇
【基金】：廣東省科技廳計(jì)劃項(xiàng)目(2011B031800375) 廣州市衛(wèi)生局科研項(xiàng)目(201102A213061) 廣州市婦女兒童醫(yī)療中心博士啟動項(xiàng)目(201011)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 廣東省梅州市人,漢族,2002年暨南大學(xué)畢業(yè),碩士,主任技師,主要從事臍帶血干細(xì)胞冷凍保存及臨床應(yīng)用相關(guān)研究。2014.37.008[http://www.crter.org](2014)37-05947-08稿件接受:2014-08-12Wu Jie-ying,Master,Seniortechnologist,Guangzhou CordBlood Bank,GuangzhouWomen and Ch

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6 侯靜;間充質(zhì)干細(xì)胞在輻射損傷后干性維持的機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 袁茵;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對不同類型腫瘤細(xì)胞惡性表型的調(diào)控作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

8 來曉瑜;一個新的人間充質(zhì)干細(xì)胞特異性表面抗原的鑒定和間充質(zhì)干細(xì)胞亞群生物學(xué)特性的研究[D];浙江大學(xué);2009年

9 韓春;牙根發(fā)育期相關(guān)間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

10 孫念政;胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞及其對糖尿病鼠降糖作用的研究[D];山東大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王敏;羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞克隆的分離和生物學(xué)特性的研究[D];華東理工大學(xué);2010年

2 蘇曉華;牛胎肝間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

3 鄧長卿;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及功能研究[D];蘇州大學(xué);2011年

4 楊晨;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離鑒定[D];吉林大學(xué);2013年

5 馬云鵬;應(yīng)用大塊平鋪法對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離、傳代、凍存及復(fù)蘇的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 那仁格日勒;溶血磷脂酸抑制人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡及其分子機(jī)理[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2013年

7 王黎明;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分泌蛋白表達(dá)譜研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

8 唐秋靈;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向男性生殖細(xì)胞分化的研究[D];汕頭大學(xué);2008年

9 徐小霞;人胎盤絨毛層間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的優(yōu)化及生物學(xué)特性的初步分析[D];蘇州大學(xué);2009年

10 王建軍;成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外長期培養(yǎng)及成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2009年

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本文編號：1092806