本文關(guān)鍵詞：CD48表達(dá)可作為區(qū)分造血干細(xì)胞分裂方式的活性標(biāo)志

  更多相關(guān)文章： 造血干細(xì)胞 CD 細(xì)胞分裂

【摘要】：造血干細(xì)胞在細(xì)胞分裂時(shí)具有維持自我更新和產(chǎn)生定向分化的能力,其依賴于三種細(xì)胞分裂方式,一個(gè)干細(xì)胞產(chǎn)生兩個(gè)新的干細(xì)胞(對(duì)稱的更新分裂)、兩個(gè)分化細(xì)胞(對(duì)稱的分化分裂)或者一個(gè)干細(xì)胞和一個(gè)分化細(xì)胞(不對(duì)稱分裂)。本研究旨在探索一種高效、穩(wěn)定的區(qū)分造血干細(xì)胞分裂方式的方法。前期研究表明,Numb蛋白的分布情況可以作為許多細(xì)胞辨別分裂方式的標(biāo)志,本研究利用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Numb蛋白在小鼠分裂期CD48-CD150+LSK細(xì)胞中的分布情況,探索Numb蛋白與中心體的關(guān)系。由于CD48表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)志著細(xì)胞失去了骨髓重建能力,因此本研究把CD48的表達(dá)作為區(qū)分造血干細(xì)胞自我更新或定向分化的一個(gè)活性標(biāo)志。從小鼠全骨髓細(xì)胞中分選出CD48-CD150+LSK細(xì)胞,培養(yǎng)體系中加入自行制備的AF 488-conjugated anti-CD48抗體,培養(yǎng)3 d后共聚焦熒光顯微鏡觀察及流式細(xì)胞分析是否存在AF488+細(xì)胞及其所占比例,然后二次分選AF488+和AF488-細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)(colony forming cell assay,CFC)與細(xì)胞增殖能力比較。結(jié)果表明:Numb蛋白在處于分裂期的CD48-CD150+LSK細(xì)胞中對(duì)稱或不對(duì)稱分布在細(xì)胞分裂平面兩側(cè),這提示Numb蛋白染色可以作為一種區(qū)分造血干細(xì)胞分裂方式的方法。此外,CD48-CD150+LSK細(xì)胞在含有自行制備的AF488-conjugated anti-CD48抗體的培養(yǎng)體系中培養(yǎng)3 d后產(chǎn)生約40%AF488+細(xì)胞,共聚焦熒光顯微鏡統(tǒng)計(jì)的陽(yáng)性細(xì)胞比例與流式細(xì)胞分析檢測(cè)結(jié)果一致。二次分選AF488+和AF488-細(xì)胞,AF488+細(xì)胞群的集落形成能力顯著高于AF488-細(xì)胞群(P0.05),AF488-細(xì)胞群的增殖能力顯著高于AF488+細(xì)胞群(P0.05)。結(jié)論:CD48表達(dá)作為細(xì)胞干性丟失的活性標(biāo)志,可區(qū)分造血干細(xì)胞的分裂方式。該方法與Numb蛋白染色方法相比,具有用于活細(xì)胞的優(yōu)勢(shì),它為后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞移植等研究工作提供了更大的便利。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所、實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 造血干細(xì)胞 CD 細(xì)胞分裂
【基金】：科技部支撐項(xiàng)目(2013BAI01B09) 科技部重大科學(xué)計(jì)劃(2013CB966902,2011CB964801,2012CB966604) 國(guó)家自然科學(xué)基金(81170465,81070390,81330015,81130074)
【分類號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cells,HSC)在生物體的整個(gè)生命周期中既能維持造血干細(xì)胞池的相對(duì)穩(wěn)定,又能增殖分化成造血系統(tǒng)各系細(xì)胞。但是,HSC是怎樣同時(shí)調(diào)控自我更新和細(xì)胞分化的,迄今為止對(duì)此問題仍不是很清楚。近幾年研究者們發(fā)現(xiàn),干細(xì)胞維持自我更新和定向分化的平衡

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周s，

本文編號(hào)：1091311