本文關(guān)鍵詞：3-甲基腺嘌呤誘發(fā)HeLa細(xì)胞自噬及抑制輻照細(xì)胞自噬的雙重作用

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【摘要】：目的了解PI3K抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)對(duì)電離輻射后細(xì)胞自噬的影響,初步探討作用機(jī)制。方法細(xì)胞增殖-毒性試劑盒CCK-8檢測(cè)不同濃度3-MA處理及60Coγ射線4Gy照射或聯(lián)合3-MA作用的HeLa細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)變化和毒性,AnnexinⅤ-FITC/PI雙標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白SQSTM1/p62表達(dá),Lipofectamine 2000介導(dǎo)轉(zhuǎn)染GFP-LC3質(zhì)粒,共聚焦顯微鏡檢測(cè)自噬體形成。結(jié)果 3mmol/L以上濃度3-MA作用24h對(duì)HeLa細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,作用更長(zhǎng)時(shí)間產(chǎn)生致死毒性效應(yīng)。無(wú)論是5mmol/L 3-MA單獨(dú)作用還是單獨(dú)4Gy照射,均能誘發(fā)HeLa細(xì)胞自噬。但3-MA與(射線輻照聯(lián)合作用時(shí),HeLa細(xì)胞自噬受到抑制,細(xì)胞凋亡顯著增加。結(jié)論 PI3K抑制劑3-MA既誘發(fā)細(xì)胞自噬又能抑制電離輻射誘發(fā)細(xì)胞自噬,以在不同的條件下兩種方式影響細(xì)胞存活。
【作者單位】： 南華大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境醫(yī)學(xué)與放射衛(wèi)生研究所;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： -甲基腺嘌呤 細(xì)胞自噬 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞存活
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31370843)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 自噬是指細(xì)胞將一些聚集或錯(cuò)誤折疊蛋白、損傷的細(xì)胞器等胞質(zhì)成分通過包裹并最終運(yùn)送至溶酶體降解的過程,可促進(jìn)細(xì)胞代謝的原料的循環(huán)再利用[1]。目前認(rèn)為,自噬的主要功能之一是真核細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)缺乏、生長(zhǎng)因子撤除、能量匱乏或受到應(yīng)激性的死亡威脅時(shí),使細(xì)胞獲得對(duì)抗不利的生長(zhǎng)

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