本文關(guān)鍵詞：小鼠腹水JWA單克隆抗體的制備鑒定

  更多相關(guān)文章： JWA基因 單克隆抗體 腹水 親和層析

【摘要】：建立小鼠腹水中JWA單克隆抗體(Monoclonalantibody,mAb)的制備方法及鑒定,獲得高純度、高效價(jià)的JWA單克隆抗體。對(duì)預(yù)先用弗氏不完全佐劑處理的小鼠腹腔接種JWA單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞,收集小鼠腹水、離心,采用Protien G親和柱層析法進(jìn)行親和層析純化JWA單克隆抗體,并采用SDS-PAGE檢測(cè)方法分析純化抗體的純度。分別運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光、免疫印跡技術(shù)鑒定純化的抗體特異性。BCA法測(cè)定純化后JWA單抗的濃度為6.79 mg/mL;SDS-PAGE電泳顯示純化的抗體只有IgG的重鏈和輕鏈,而沒有其它雜蛋白帶;純化后的JWA單抗在免疫熒光實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)到細(xì)胞中JWA蛋白在胞漿中呈絲狀均勻分布,與前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。免疫印跡實(shí)驗(yàn)中1∶800、1∶400均可以得到清晰的目的條帶。用Protein G親和層析法獲得了高純度和較高效價(jià)的JWA單克隆抗體,這將為JWA蛋白的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究提供技術(shù)支持。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： JWA基因 單克隆抗體 腹水 親和層析
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No.30930030) 江蘇省優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(環(huán)境衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué))
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： JWA(GenBank:AF070523,1998)是周建偉等從培養(yǎng)的原代人氣管和支氣管上皮細(xì)胞中分離并克隆的,受全反式維甲酸(ATRA)誘導(dǎo)的新的細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白[1]。JWA在人染色體定位是3p14;cDNA全長(zhǎng)為2.1 kb,其編碼蛋白定位于細(xì)胞漿,含188個(gè)氨基酸,JWA在生物進(jìn)化中保守。JWA基因是一種環(huán)境應(yīng)

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 孔君;劉箐;韓躍武;王天昌;劉金芝;;單克隆抗體制備技術(shù)的最新進(jìn)展及應(yīng)用前景[J];免疫學(xué)雜志;2011年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃建芳;王彩霞;向軍儉;呂思;黃晟;;凡納濱對(duì)蝦主要過敏原-原肌球蛋白單克隆抗體的制備及其過敏原表位分析[J];免疫學(xué)雜志;2012年09期

2 陳洪淼;宋振鎮(zhèn);陳壯荔;王振;胡國(guó)鵬;馮魏;;肥大細(xì)胞表面抗原-1高靈敏度定量分析法的建立[J];免疫學(xué)雜志;2012年09期

3 甘麗晶;劉曉波;胡質(zhì)毅;;抗體分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年04期

4 趙慧娟;臧學(xué)麗;謝蕙明;楊賀;劉詩(shī)音;;單克隆抗體的應(yīng)用現(xiàn)狀及前景[J];吉林農(nóng)業(yè);2013年02期

5 曹建彪;李世榮;夏長(zhǎng)虹;郭漢斌;李浩然;龔麗娟;;抗大腸癌相關(guān)蛋白SCAP47抗體的制備與鑒定[J];解放軍醫(yī)藥雜志;2013年05期

6 王志明;王雪;賈寅星;楊立霞;;HIV納米抗體的研究進(jìn)展[J];免疫學(xué)雜志;2013年09期

7 張娜;劉學(xué)芳;;皰疹病毒相關(guān)性泛素特異蛋白酶(HAUSP)單克隆抗體的制備及鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2013年11期

8 賀江;劉賢金;;甲氧基有機(jī)磷農(nóng)藥廣譜特異性多克隆抗體的親和純化[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年04期

9 牛登云;張蕾;劉昊;孫彥剛;陳冠華;閆喜軍;單虎;;水貂細(xì)小病毒單克隆抗體的制備及純化方法的優(yōu)化[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年23期

10 王艷茹;邱玉華;;抗人B7-1人-鼠嵌合抗體體內(nèi)外抑瘤作用研究[J];免疫學(xué)雜志;2015年09期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 徐曉麗;對(duì)蝦白斑癥病毒和魚類淋巴囊腫病毒檢測(cè)抗體芯片的制備與應(yīng)用[D];中國(guó)海洋大學(xué);2011年

2 陳婷梅;人胱抑素C抗體制備和檢測(cè)方法建立及其方法學(xué)評(píng)價(jià)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

3 李秋澤;人細(xì)胞外基質(zhì)包被豬去細(xì)胞瓣膜支架組織工程心臟瓣膜研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 侯淑萍;衣原體噬菌體phiCPG1衣殼蛋白Vp1單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

5 田梅;晚期氧化蛋白產(chǎn)物單克隆抗體制備的實(shí)驗(yàn)及應(yīng)用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

6 童紅飛;新型疏水性電荷誘導(dǎo)配基設(shè)計(jì)及層析分離抗體研究[D];浙江大學(xué);2014年

7 盧慧麗;層析介質(zhì)孔徑與配基密度對(duì)蛋白吸附性能影響及抗體分離研究[D];浙江大學(xué);2014年

8 薛書江;豬附紅細(xì)胞體吉林株單克隆抗體的制備應(yīng)用和免疫蛋白組學(xué)研究[D];延邊大學(xué);2014年

9 宋百軍;抗犬賈第蟲α-12賈第素單克隆抗體的制備及應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 譚雯雯;豬β-防御素2多克隆和單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 黃成斌;抗傳染性法氏囊病毒單抗的制備和VP2基因的序列分析[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 鄧妍;Fpr3的原核表達(dá)及其單克隆抗體的制備[D];華中師范大學(xué);2011年

4 朱立鑫;建立免疫親和柱聯(lián)合高效液相色譜法檢測(cè)蘇丹紅Ⅰ[D];南昌大學(xué);2011年

5 孫夢(mèng)梅;抗EGFR人源化抗體的構(gòu)建、表達(dá)、純化和功能分析[D];安徽大學(xué);2011年

6 肖莉;1.tmTNF-α通過TNFR2誘導(dǎo)凋亡的信號(hào)途徑 2.抗體的制備及鑒定[D];華中科技大學(xué);2011年

7 李云;抗D-二聚體單克隆抗體的制備和鑒定[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2011年

8 張利仙;STLV-1病毒間接ELISA方法建立及雜交瘤細(xì)胞株的篩選[D];昆明理工大學(xué);2011年

9 王艷;穩(wěn)定分泌抗羊種布魯菌脂多糖單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的建立[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

10 潘芹芹;促黃體素釋放激素單克隆抗體的研制及去勢(shì)疫苗相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 孟夏萌;高志賢;段宏泉;;核糖體展示技術(shù)原理與應(yīng)用[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

2 李莉,王麗花,孔憲濤;單克隆抗體治療的過去、現(xiàn)在和未來[J];免疫學(xué)雜志;2005年S1期

3 戴楠;曹曉靜;楊宇馨;李夢(mèng)俠;易維今;王東;胡川閩;;人脫嘌呤脫嘧啶核酸內(nèi)切酶單克隆抗體的制備及其生物學(xué)特性鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2010年03期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高紅旺,張秀榮,許英愛,王雅君;單克隆抗體在抗癌領(lǐng)域中的應(yīng)用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年02期

2 汪保安,汪寅章,夏風(fēng)城,陸思珍,黃兆堅(jiān),郭愛巖,馬芳玲,張育青;促腎上腺皮質(zhì)激素單克隆抗體的篩選和鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2001年05期

3 楊聯(lián)萍,單中元,佟明華,易學(xué)瑞,萬(wàn)華印,曾平魯,孔祥平;一組抗重組人肝再生增強(qiáng)因子單克隆抗體的制備與鑒定[J];中國(guó)病理生理雜志;2001年05期

4 吳向東,李保仝,邵海楓,宗永蘭,齊名,武建國(guó);人紅細(xì)胞血型糖蛋白A單克隆抗體的初步鑒定[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2001年01期

5 李琦,歐陽(yáng)為明,賈衛(wèi),劉雪松,韓衛(wèi)寧,劉飛,謝鑫,蘇麗,金伯泉;抗人白細(xì)胞介素-4單克隆抗體的制備及應(yīng)用研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年04期

6 楊唐斌,曲麗娜;單克隆抗體研究新進(jìn)展[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2002年06期

7 邵曉楓,熊冬生,李容,彭暉,劉嘉,楊銘,許元富,范冬梅,朱楨平,楊純正;抗KDR3單克隆抗體的制備和生物活性的鑒定[J];中國(guó)腫瘤臨床;2003年11期

8 馬穎,鄒全明,朱永紅,羅萍,毛旭虎;抗重組人白細(xì)胞介素18單克隆抗體的制備與特性研究[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2003年06期

9 霍晨敏,朱昀,孫進(jìn)偉,吳立柱,沈銀柱,黃占景;單克隆抗體制劑的最新進(jìn)展[J];河北師范大學(xué)學(xué)報(bào);2004年05期

10 何忠效;淺談單克隆抗體[J];生物學(xué)通報(bào);2004年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊智紅;熊承良;;尿激酶型纖溶酶原激活因子單克隆抗體的制備及鑒定[A];湘鄂贛首屆性與生殖健康學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2007年

2 李偉;林志;齊衛(wèi)紅;梁春男;楊艷偉;汪巨峰;李波;;抗VEGF單克隆抗體的臨床前安全性評(píng)價(jià)[A];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

3 沈泓;梅建鳳;朱克寅;李敏;應(yīng)國(guó)清;;人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體的制備[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

4 寧云山;司徒維娜;李妍;彭丹丹;洪燕華;劉宜楚;賀福初;孫啟鴻;李明;;人類血漿蛋白單克隆抗體庫(kù)的初步建立及應(yīng)用研究[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

5 尹鐵英;王亞洲;王貴學(xué);;血小板膜糖蛋白單克隆抗體在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病中的應(yīng)用[A];2007第一屆全國(guó)介入醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

6 曲海霞;胡和平;孫啟鴻;;鼠抗人醛脫氫酶1A1單克隆抗體的制備與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

7 鞠吉雨;周群芳;王麗娜;邸大琳;;抗人骨橋蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

8 劉健宏;王標(biāo);莊向生;王長(zhǎng)兵;周倫江;劉玉濤;;單克隆抗體與免疫熒光染色技術(shù)[A];福建省科協(xié)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)衛(wèi)星會(huì)議——畜牧業(yè)持續(xù)發(fā)展對(duì)策學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

9 安星蘭;陸梅生;李萬(wàn)波;安鐵洙;滕春波;;人肌紅蛋白單克隆抗體的制備[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十七次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2012年

10 邴國(guó)霞;張鶴曉;張利峰;吳清民;劉金華;段向英;江育林;;鯉春病毒單克隆抗體的研制及其初步應(yīng)用[A];京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會(huì)暨新思想、新觀點(diǎn)、新方法論壇論文集[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 記者 尹暉;單克隆抗體研發(fā)進(jìn)入新階段[N];無(wú)錫日?qǐng)?bào);2010年

2 編譯 李勇;單克隆抗體：生物類似藥開發(fā)的秘鑰[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

3 廣凱;單克隆抗體藥物將有大發(fā)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

4 ;單克隆抗體應(yīng)用前景看好[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

5 黃東臨;羅氏叱咤單克隆抗體市場(chǎng)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

6 ;單克隆抗體異軍突起[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

7 尹暉;全球最大單克隆抗體研制基地落戶無(wú)錫[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

8 尹暉;最大單克隆抗體研制項(xiàng)目在馬山奠基[N];無(wú)錫日?qǐng)?bào);2010年

9 數(shù)文;羅氏買進(jìn)抗癌單克隆抗體[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

10 毛文波;單克隆抗體：征服癌癥的新方法[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 白宇;馬γ-干擾素單克隆抗體的制備及細(xì)胞免疫評(píng)價(jià)方法的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

2 余自強(qiáng);抗血小板膠原受體糖蛋白VI單克隆抗體的制備和功能研究[D];蘇州大學(xué);2005年

3 秦克鋒;單純皰疹病毒糖蛋白的特性研究及其單克隆抗體的臨床應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1989年

4 游曉華;腦鈉肽單克隆抗體的制備及初步臨床應(yīng)用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 孟星宇;芘和萘單克隆抗體的制備及免疫檢測(cè)技術(shù)的研究[D];吉林大學(xué);2015年

6 胡敏;載脂蛋白M重組蛋白和單克隆抗體的制備及其初步臨床應(yīng)用[D];中南大學(xué);2008年

7 溫新宇;人CD38分子的克隆表達(dá)、單克隆抗體的制備及其功能的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 秦迎松;人促血液血管細(xì)胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

9 張雪芳;抗gremlin 1單克隆抗體的制備和初步鑒定[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

10 李振宇;抗FVⅢ-C2區(qū)單克隆抗體的制備及功能研究[D];蘇州大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬泓冰;幾種單克隆抗體純化方法的比較性研究[D];蘇州大學(xué);2005年

2 許靜;小鼠抗蛋清提取物單克隆抗體的制備與初步鑒定[D];南昌大學(xué);2007年

3 王林林;抗人早孕因子單克隆抗體的制備[D];鄭州大學(xué);2011年

4 張朋;鯉春病毒血癥病毒單克隆抗體的制備及其免疫學(xué)檢測(cè)方法的建立[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 鄭怡麟;抗人降鈣素原特異性單克隆抗體的制備及其免疫傳感器的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 高曉飛;人紅細(xì)胞血型糖蛋白B單克隆抗體的制備[D];揚(yáng)州大學(xué);2007年

7 李濤;抗黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備與特性鑒定[D];山東師范大學(xué);2008年

8 何靖玄;琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)移酶硝基化酪氨酸位點(diǎn)特異單克隆抗體的制備[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 于海雙;普洱茶茶褐素單克隆抗體的制備[D];長(zhǎng)春理工大學(xué);2012年

10 譚雯雯;豬β-防御素2多克隆和單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：1085617