發(fā)布時(shí)間：2017-10-23 11:33

  本文關(guān)鍵詞：酵母雙雜交篩選與CVB3 VP3相互作用的人心臟蛋白

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【摘要】：目的從人心臟cDNA文庫(kù)中篩選與B3型柯薩奇病毒(coxsackievirus group B type 3,CVB3)結(jié)構(gòu)蛋白VP3相互作用的蛋白,為進(jìn)一步研究CVB3分子致病機(jī)制提供新的線索。方法構(gòu)建酵母雙雜交重組質(zhì)粒(pGBKT7-VP3),轉(zhuǎn)化至感受態(tài)酵母菌AH109,檢測(cè)BD-cMyc-VP3融合蛋白自激活,應(yīng)用酵母雙雜交篩選與CVB3VP3相互作用的人心臟蛋白。對(duì)陽(yáng)性候選克隆進(jìn)行測(cè)序和同源性比對(duì)分析;α-半乳糖苷酶活性定量分析VP3與各陽(yáng)性蛋白之間相互作用的強(qiáng)弱。結(jié)果誘餌質(zhì)粒pGBKT7-VP3構(gòu)建成功,檢測(cè)到BD-cMyc-VP3融合蛋白在AH109中表達(dá),且誘餌蛋白VP3在酵母中不存在自激活,從人心臟cDNA文庫(kù)中篩選到10個(gè)與CVB3VP3相互作用的蛋白:真核翻譯起始因子4A2、羥酰輔酶A脫氫酶三官能蛋白轉(zhuǎn)錄變體3、肌鈣蛋白I3型、平滑肌蛋白3、線粒體乙醛脫氫酶2等。結(jié)論本研究成功應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)篩選出與CVB3VP3相互作用的10個(gè)蛋白。為研究CVB3引起心肌炎和心肌疾病的分子致病機(jī)制提供了一些新的線索。
【作者單位】： 南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 酵母雙雜交 CVB VP 蛋白相互作用
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81160196,No.30660010) 江西省青年科學(xué)家培養(yǎng)項(xiàng)目(20133BCB23005) 江西省研究生創(chuàng)新專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目(YC2012-S020) 江西省自然科學(xué)基金(20120BAB205042)聯(lián)合資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R378
【正文快照】： Screening CVB3VP3interacting proteins from cDNA libraryof human heart by yeast two hybridizationZHANG Zhi-qin1,ZHAO Ying-jie1,XIA Yan-hua1,WANG Jing1,XIANG Guo-shi 1,ZOU Ye-qing2,HUANG Xiao-tian1(1.Department of Medical Microbiology,Medical College,Nanch

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 劉發(fā)娣;余克花;羅達(dá)亞;徐秋芳;莫冰;羅軍;劉晶星;黃孝天;;酵母雙雜交技術(shù)篩選與CVB3 VP1直接作用的細(xì)胞蛋白[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2009年10期

2 李柏巖,喬國(guó)芬,周宏,李文漢,黃志剛,周令望;細(xì)胞內(nèi)游離鈣與柯薩奇病毒B_3誘導(dǎo)的大鼠培養(yǎng)心肌細(xì)胞凋亡(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;1999年05期

3 張靜怡;趙穎潔;李秀珍;方舒;何冰清;劉曦;羅軍;黃孝天;;酵母雙雜交篩選與CVB3 3A相互作用的人心臟蛋白[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2014年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 郝慶欽;周建平;韓旭;劉培;許秀麗;溫新宇;王玲;田亞平;;一對(duì)高親和力抗人肌鈣蛋白I單克隆抗體的制備及鑒定[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2014年04期

2 趙艷玲,馬和平,李柏巖;家兔主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員及小檗胺作用的共聚焦研究(英文)[J];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2000年02期

3 金桂林;莫冰;劉發(fā)娣;徐秋芳;劉昕;應(yīng)穎;趙穎潔;羅軍;黃孝天;;CVB3損傷HeLa細(xì)胞高爾基體結(jié)構(gòu)的機(jī)制研究[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2012年06期

4 張靜怡;趙穎潔;李秀珍;方舒;何冰清;劉曦;羅軍;黃孝天;;酵母雙雜交篩選與CVB3 3A相互作用的人心臟蛋白[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐薇;新型chitosan-DNA疫苗誘生CVB3特異粘膜免疫及其預(yù)防病毒性心肌炎的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 徐薇,沈燕,陳瑞珍,熊思東;含融內(nèi)體多肽的新型B3型柯薩奇病毒DNA疫苗對(duì)小鼠病毒性心肌炎的預(yù)防作用[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

2 黃孝天,陳洪,吳峗,陳宏新,劉晶星;重組柯薩奇B3病毒VP1基因的穿梭表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定[J];中國(guó)人獸共患病雜志;2004年05期

3 黃孝天,陳宏新,陳洪,吳斌貝,劉晶星;柯薩奇病毒B3型VP1基因在釀酒酵母中的表達(dá)[J];中國(guó)人獸共患病雜志;2005年07期

4 劉發(fā)娣;余克花;羅達(dá)亞;徐秋芳;莫冰;羅軍;劉晶星;黃孝天;;酵母雙雜交技術(shù)篩選與CVB3 VP1直接作用的細(xì)胞蛋白[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2009年10期

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本文編號(hào)：1083186