本文關(guān)鍵詞：軟骨細(xì)胞復(fù)合人臍帶Wharton膠取向支架的體外評估

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【摘要】：目的將軟骨細(xì)胞復(fù)合于人臍帶Wharton膠取向支架,體外評估該支架對軟骨細(xì)胞的影響和作用。方法取成年新西蘭大白兔肩關(guān)節(jié)軟骨組織分離培養(yǎng)軟骨細(xì)胞。取正常新生兒臍帶組織,通過濕潤粉碎結(jié)合化學(xué)脫細(xì)胞技術(shù)脫細(xì)胞,利用冷凍干燥及交聯(lián)等技術(shù)制備人臍帶Wharton膠取向支架。取第2代軟骨細(xì)胞與人臍帶Wharton膠取向支架復(fù)合培養(yǎng),倒置顯微鏡、掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架上分布及黏附情況;甲苯胺藍(lán)、番紅O染色觀察細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)分泌情況;二乙酰熒光素-碘化丙啶雙色熒光檢測法染色及Hoechst33258染色評估細(xì)胞在支架上的活力及增殖情況;將體外PKH26熒光標(biāo)記的軟骨細(xì)胞與支架復(fù)合培養(yǎng),熒光顯微鏡觀察。結(jié)果倒置顯微鏡觀察示,培養(yǎng)3 d細(xì)胞在支架孔隙內(nèi)分布較均勻,呈圓形或橢圓形;掃描電鏡觀察示,培養(yǎng)7 d大量細(xì)胞黏附于支架孔隙間,呈圓形或橢圓形,且細(xì)胞沿取向孔道伸展排列,相互聚集,增殖旺盛;組織學(xué)觀察示,培養(yǎng)7 d,細(xì)胞在支架中分布均勻且增殖旺盛,細(xì)胞分泌大量細(xì)胞外基質(zhì),取向支架能引導(dǎo)細(xì)胞遷徙和增殖,并能有效保留和促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)分泌;細(xì)胞活力評估結(jié)果示,培養(yǎng)3 d見支架上黏附的大部分細(xì)胞為活細(xì)胞,細(xì)胞成活率高達(dá)90%以上。熒光顯微鏡觀察示,熒光標(biāo)記細(xì)胞與支架復(fù)合培養(yǎng)1 d,細(xì)胞在支架內(nèi)部均勻分布,增殖旺盛。結(jié)論人臍帶Wharton膠取向支架具有良好的親和性和細(xì)胞相容性,有利于軟骨細(xì)胞黏附和增殖,細(xì)胞存活率高,是一種比較理想的軟骨組織工程支架材料。
【作者單位】： 佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨外一科;解放軍總醫(yī)院骨科研究所;
【關(guān)鍵詞】： 軟骨組織工程 人臍帶Wharton膠 取向支架 軟骨細(xì)胞
【基金】：黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練資助項(xiàng)目(201310222006) 國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練資助項(xiàng)目(1110150221) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)資助項(xiàng)目(2102AA020502)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 關(guān)節(jié)軟骨無血管、神經(jīng)支配及淋巴回流,損傷后再生能力有限。組織工程技術(shù)的興起為關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)帶來了希望。近年有研究發(fā)現(xiàn)[1],臍帶Wharton膠富含透明質(zhì)酸、糖胺聚糖及膠原等成分,是一種無血管、神經(jīng)支配及淋巴回流的組織,且臍帶Wharton膠富有彈性以保護(hù)臍帶血管,無論在成

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