成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的定向成骨誘導(dǎo)
本文關(guān)鍵詞:成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的定向成骨誘導(dǎo)
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【摘要】:背景:脂肪分離可獲得大量的間充質(zhì)干細(xì)胞并成功向骨、軟骨、脂肪、心肌等多個(gè)方向誘導(dǎo)分化。目的:建立成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)、成骨分化方法,并探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞作為骨組織工程的種子細(xì)胞的前景。方法:通過(guò)膠原酶消化法從成人脂肪中分離間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記物,CCK8檢測(cè)細(xì)胞活性,成骨誘導(dǎo)液誘導(dǎo)干細(xì)胞向骨細(xì)胞分化,BCIP/NBT比色法染色檢測(cè)堿性磷酸酶,茜素紅染色檢測(cè)鈣結(jié)節(jié)形成,RT-PCR檢測(cè)堿性磷酸酶,骨橋蛋白表達(dá)變化。結(jié)果與結(jié)論:利用脂肪抽吸液成功培養(yǎng)出脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,且能穩(wěn)定傳代,增殖能力旺盛;流式細(xì)胞儀檢測(cè)證實(shí)有特定的間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物表達(dá);成骨誘導(dǎo)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞后呈典型的成骨細(xì)胞形態(tài);堿性磷酸酶染色陽(yáng)性,茜素紅染色后可見鈣結(jié)節(jié)形成,成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)0,3,7,14,21,28 d,RT-PCR定量檢測(cè)結(jié)果證實(shí)堿性磷酸酶、骨橋蛋白陽(yáng)性表達(dá)。說(shuō)明用酶消化法可以從人脂肪中分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞可向骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化,陽(yáng)性表達(dá)骨橋蛋白,堿性磷酸酶,是一種優(yōu)良的骨組織工程的種子細(xì)胞。
【作者單位】: 徐州醫(yī)學(xué)院研究生院;徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院整形外科;政道干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 干細(xì)胞 間質(zhì)干細(xì)胞 皮下脂肪 成骨細(xì)胞 骨橋蛋白質(zhì) 脂肪干細(xì)胞 培養(yǎng) 誘導(dǎo) 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化 組織工程骨 顱骨缺損 堿性磷酸酶 骨橋蛋白
【基金】:江蘇省科教興衛(wèi)重點(diǎn)人才資助項(xiàng)目(RC2011115)~~
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)人類脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離,萃取,鑒定,并進(jìn)行了脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)分化,驗(yàn)證了脂肪干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化的能力及作為骨組織工程的種子細(xì)胞的可行性,下一步將進(jìn)行種子細(xì)胞復(fù)合支架材料,實(shí)驗(yàn)將制成一種可注射的支架材料,并將在裸鼠體內(nèi)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條
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【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 李邦安;劉鵬鵬;;數(shù)字化多點(diǎn)成型技術(shù)塑形鈦網(wǎng)修補(bǔ)顱骨缺損16例[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年07期
2 張立智;張先龍;王琦;陳云蘇;沈?yàn)?邵俊杰;蔣W,
本文編號(hào):1069663
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