本文關(guān)鍵詞：抗人CA125單克隆抗體的制備、鑒定及化學(xué)發(fā)光體系的建立

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【摘要】：目的制備抗人糖抗原125(CA125)單克隆抗體(mAb),并建立化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測體系。方法將人CA125抗原免疫小鼠,通過細(xì)胞融合、篩選后得到雜交瘤細(xì)胞株。經(jīng)細(xì)胞擴大培養(yǎng)及純化獲得mAb,鑒定其特異性、純度、亞型及效價,并建立雙抗體夾心ELISA。分別對包被緩沖液、包被濃度和加樣模式進(jìn)行優(yōu)化和選擇后,建立化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測體系,并對其進(jìn)行評估和血樣的測定。結(jié)果獲得3株抗人CA125的雜交瘤細(xì)胞株(30-1-4、31-1-5、43-1-6),不與CA199、CA50、CA724交叉,效價在1∶108以上,用30-1-4和31-1-5建立的化學(xué)發(fā)光免疫分析法經(jīng)優(yōu)化后,檢測范圍為0~1 000 U/mL,最低檢測限為0.72 U/mL,與羅氏試劑檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)大于0.90。結(jié)論成功制備了抗人CA125 mAb,建立并優(yōu)化了人CA125的化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測體系,為CA125檢測及卵巢癌的診斷奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;大慶麥伯康生物技術(shù)有限公司;東北林業(yè)大學(xué)大慶生物技術(shù)研究院;
【關(guān)鍵詞】： CA 單克隆抗體 夾心ELISA 化學(xué)發(fā)光免疫分析法
【基金】：黑龍江省發(fā)展高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)專項資金(FW11C201) 黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計劃項目(GC13C122)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 卵巢癌的死亡率高居婦科癌癥首位,嚴(yán)重威脅女性健康。但由于卵巢的胚胎發(fā)育、組織解剖及內(nèi)分泌功能較復(fù)雜,因此早期診斷卵巢癌比較困難[1-2]。發(fā)現(xiàn)卵巢癌時70%患者已屬晚期,5年生存率僅為20%~30%。因此尋找完善的早期診斷方法對卵巢癌患者的診斷和指導(dǎo)治療有重要意義。糖抗原1

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4 杜雪梅;唐麗;任飛W

本文編號：1043725