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改良全骨髓貼壁法分離與純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

發(fā)布時(shí)間:2017-10-13 02:25

  本文關(guān)鍵詞:改良全骨髓貼壁法分離與純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞


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【摘要】:目的探討有效的分離與純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)方案,并研究BMSCs基本生物學(xué)特性。方法取SPF級(jí)4周齡健康SD大鼠1只,采用改良全骨髓貼壁法分離提取BMSCs,用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化及其生長(zhǎng)特性,利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)P3代細(xì)胞表面標(biāo)志物,細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK)-8法繪制P3代細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。結(jié)果體外分離的原代細(xì)胞可見典型的貼壁生長(zhǎng),形態(tài)以梭形和多角形為主,呈旋渦狀細(xì)胞集落,約8 d可達(dá)80%以上融合。傳代純化后細(xì)胞形態(tài)均一,具有較強(qiáng)的增殖能力。生長(zhǎng)曲線提示BMSCs呈S形趨勢(shì)。P3代BMSCs代表面標(biāo)志物分化群(CD)29、CD90陽性表達(dá),而CD11b、CD45陰性表達(dá)。結(jié)論改良全骨髓貼壁法可獲得高純度、增殖活躍、生物學(xué)特性穩(wěn)定的BMSCs,BMSCs的生長(zhǎng)曲線呈S形趨勢(shì)。
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院肝移植中心;
【關(guān)鍵詞】間充質(zhì)干細(xì)胞 全骨髓貼壁法 大鼠
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81070382) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011B061300028)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是(bone marrow養(yǎng)瓶中,每瓶液體總量為3 ml,置于37℃、5%CO2mesenchymal stem cells,BMSCs)是一類來源于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。3 h后棄貼壁細(xì)胞,將上層懸浮細(xì)中胚層的多能干細(xì)胞,它存在于人或動(dòng)物的骨髓組胞轉(zhuǎn)移至另一個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),24 h后半量更織中,具有體外

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邢昕;呂蓉;李素萍;劉忠;;體外分離培養(yǎng)人源性脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞及其鑒定[J];中國(guó)輸血雜志;2013年08期

2 李陳;肖玉周;;不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性差異研究進(jìn)展[J];創(chuàng)傷外科雜志;2014年01期

3 于祥茹;韓曉謙;袁浩天;董志恒;程梁;吳哲;;PLGA/CPC支架材料復(fù)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建組織工程骨的體外效果評(píng)價(jià)[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

4 劉蘋;史春夢(mèng);胡玲莉;張波;王正國(guó);;脂肪源性干細(xì)胞無酶分離培養(yǎng)方法的研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年10期

5 陳聰聰;程迅生;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基因治療骨缺損的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)學(xué);2014年04期

6 王榮;鄧運(yùn)濤;陳強(qiáng);;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的初步研究[J];中國(guó)輸血雜志;2014年08期

7 陳林;張坤;董偉;楊珂;艾輝;陳祿華;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清和含胎牛血清培養(yǎng)體系比較[J];重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué));2014年09期

8 王露;翟瑋瑋;楊向榮;王芳;李見;張強(qiáng);李玉云;;慢病毒介導(dǎo)RNA干擾沉默F(xiàn)as基因在臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年10期

9 李敏敏;鄒亞偉;彭淑梅;唐遠(yuǎn)平;林英;陳福雄;王波;;可溶性因子在白血病患兒骨髓間質(zhì)細(xì)胞耐藥中的作用[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年21期

10 朱舜之;朱慧志;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)哮喘免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J];長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2015年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張可華;袁寶珠;;治療性干細(xì)胞產(chǎn)品相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因素[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

2 Qinjun Zhao;Hongying Ren;Zhongchao Han;;Mesenchymal stem cells: Immunomodulatory capability and clinical potential in immune diseases[A];第十四屆全國(guó)腫瘤生物治療大會(huì)論文集[C];2015年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱天琦;GDNF和NT-3雙基因誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

2 茍麗娟;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為軟骨細(xì)胞過程中microRNA作用機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 陳書連;1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小鼠異基因骨髓移植后aGVHD的作用研究 2、成人急性淋巴細(xì)胞白血病自體移植的臨床研究及相關(guān)預(yù)后因素[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

4 關(guān)劍;胰腺癌間充質(zhì)干細(xì)胞樣腫瘤相關(guān)纖維母細(xì)胞功能研究及維甲酸對(duì)腫瘤相關(guān)纖維母細(xì)胞抑制性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

5 楊舟鑫;CD106是具有強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能的胎盤絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)志[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

6 付蘇;脂肪來源基質(zhì)血管成分細(xì)胞與脂肪顆粒共移植后的生物學(xué)轉(zhuǎn)歸[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

7 王有為;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞臨床前安全性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

8 李陽;人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向雪旺細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及對(duì)外周面神經(jīng)損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

9 丁曉霜;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞治療局部腦缺血作用機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

10 及月茹;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞增殖和終末分化[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曲戈;IL-24基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞向肺癌靶向遷移的體外研究[D];鄭州大學(xué);2013年

2 徐揚(yáng)陽;重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)脂肪干細(xì)胞分化的影響[D];鄭州大學(xué);2013年

3 楊穎珂;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦出血大鼠血腫周圍凋亡及P75NTR、TrkA表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2013年

4 左彬;SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)體外培養(yǎng)方法改良[D];鄭州大學(xué);2013年

5 馬云鵬;應(yīng)用大塊平鋪法對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離、傳代、凍存及復(fù)蘇的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 劉方方;大鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞分化的體外研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

7 王學(xué)良;乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中CD105~+/CD90~+細(xì)胞群的特性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

8 馬欣;模擬肝臟組織微環(huán)境對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞樣細(xì)胞分化的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

9 李涵;富勒烯衍生物調(diào)控腫瘤微環(huán)境中成纖維細(xì)胞功能的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

10 吳卓;定向誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞方向分化過程中Nkx2.5的表達(dá)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李明;蔡德鴻;張樺;袁小澎;劉敏;張振;陳宏;;間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合骨髓細(xì)胞輸注誘導(dǎo)胰島移植免疫耐受的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

2 王太平;徐國(guó)彤;周琪;李凌松;裴雪濤;;國(guó)際干細(xì)胞研究學(xué)會(huì)《干細(xì)胞臨床轉(zhuǎn)化指南》[J];生命科學(xué);2009年05期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王曉慶;仲照東;陳智超;鄒萍;;全骨髓貼壁法培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的改良研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2014年02期

2 康健;侯洋;周許輝;楊立利;陳華江;唐先業(yè);袁文;;全骨髓貼壁法獲取組織工程髓核種子細(xì)胞的相關(guān)研究[J];生物骨科材料與臨床研究;2014年01期

3 何丁文;殷嫦嫦;殷明;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞研究[J];九江學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年04期

4 李雙月;戚媛;陳若琳;王哲敏;劉爽;樸豐源;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及優(yōu)勢(shì)[J];中國(guó)組織工程研究;2014年10期

5 宋明艷;李娜;姜彥;于龍剛;;全骨髓貼壁法體外分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];山東醫(yī)藥;2014年27期

6 張利銘;陳智超;鄒萍;李秋柏;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及成骨誘導(dǎo)分化[J];臨床血液學(xué)雜志;2012年03期

7 肖仕輝;韋慶軍;趙勁民;薄占東;韋積華;李偉岸;;全骨髓貼壁法培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向成骨誘導(dǎo)分化及鑒定[J];中國(guó)組織工程研究;2013年06期

8 蔡鵬;朱紹興;蘇一鳴;黃世勇;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其誘導(dǎo)分化[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年36期

9 劉賢華;仝青英;白曉東;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外不同分離與培養(yǎng)方法的比較[J];武警醫(yī)學(xué);2012年10期

10 周達(dá)岸;鄭洪新;李靜;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J];山東醫(yī)藥;2011年24期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 曲鐵兵;川芎嗪預(yù)處理促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的體外研究[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2014年

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本文編號(hào):1022312

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