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Toll樣受體亞型在干細(xì)胞成骨過程中的作用

發(fā)布時間:2017-10-12 21:37

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【摘要】:[目的]探索大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)成骨過程各階段,不同Toll樣受體(Toll Like Receptor,TLR)亞型的作用。[方法]利用貼壁培養(yǎng)法分離純化SD大鼠BMSCs,傳代擴(kuò)增,免疫熒光分析檢測細(xì)胞表面分子CD44、CD105、Vimentin的表達(dá)并進(jìn)行細(xì)胞鑒定。選取活力好的第3代細(xì)胞,隨機(jī)分為3組:空白組,TLR-3激活組和TLR-4激活組,均以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液在相同的環(huán)境下培養(yǎng)。Westernblot法檢測Collagen-I和Osteocalcin的表達(dá),觀察干細(xì)胞向成骨細(xì)胞(Osteoblast,OB)分化。于培養(yǎng)10、14 d進(jìn)行堿性磷酸酶染色及茜素紅染色,觀察礦化結(jié)果。[結(jié)果]細(xì)胞表面抗原CD44、CD105、Vimentin呈陽性。Collagen-I和Osteocalcin的蛋白表達(dá)依次為,TLR-4激活組TLR-3激活組空白組。3組堿性磷酸酶染色及茜素紅染色均呈陽性,TLR-3激活組強(qiáng)度最高,TLR-4激活組和空白組差異不明顯。[結(jié)論]在BMSC成骨過程中,不同TLR亞型在不同的階段起作用,TLR-3和TLR-4均可在BMSCs向OB分化過程中起促進(jìn)作用,TLR-4的效果更明顯。在OB成熟礦化為骨細(xì)胞的過程中,TLR-3起促進(jìn)作用,而TLR-4則起抑制作用。
【作者單位】: 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;江蘇大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院;江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】Toll樣受體 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化 礦化
【基金】:鎮(zhèn)江市科技發(fā)展基金項目(編號:SH2002019)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 骨移植術(shù)是治療骨缺損、骨折不愈合以及脊柱融合手術(shù)的常見技術(shù),自體骨移植(如髂骨移植或腓骨移植)雖然效果明確,但存在增加手術(shù)創(chuàng)傷、增加感染機(jī)會以及取骨量有限諸多缺點。隨著組織工程學(xué)的發(fā)展,學(xué)者開始研究各種替代性人工骨材料。早期的人工骨材料實際上僅僅作為一種組織

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3 湯順清,毛萱,石海濤,周長忍,裴國獻(xiàn),陳濱;組織工程骨的成骨過程和組織學(xué)評價[J];暨南大學(xué)學(xué)報;2003年01期

4 張炳新,張繼平,蔡自力,閆常紅;珊瑚人工骨的實驗研究[J];南京軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1997年04期

5 薛敏!210008,張炳新,蔡自力,閻常虹;珊瑚人工骨的實驗研究[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2000年02期

6 徐又佳,鄭祖根,王曉東,董啟榕,沈憶新,成茂華,蔡麗君;可吸收固定材料對實驗性骨折愈合影響的超微結(jié)構(gòu)觀察[J];中華骨科雜志;1996年10期

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8 金丹,裴國獻(xiàn),王前,魏寬海;骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)骨發(fā)生潛能及條件研究[J];中國矯形外科雜志;2000年06期

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10 王素珍,戚基萍,楊金英;精制骨形態(tài)蛋白誘導(dǎo)膜性成骨的組織學(xué)研究[J];黑龍江醫(yī)學(xué);1998年10期

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1 盧茲凡;朱幫福;陳蘇民;蒲勤;路凡;陳南春;;人骨形成蛋白3在昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)、純化及其誘骨活性檢測[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

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本文編號:1021060

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