本文關(guān)鍵詞：人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞釋放膜微囊條件探索

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【摘要】：間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)釋放膜微囊(MV)是其促血管再生的重要機(jī)制。本研究旨在探索人骨髓MSC釋放MV的適宜條件。收集5份健康人骨髓標(biāo)本,分離培養(yǎng)并鑒定MSC。將第5代MSC分別懸浮于含10%胎牛血清或無(wú)血清的培養(yǎng)液中,按2×106/皿接種于直徑為150 mm的培養(yǎng)皿中,在低氧(1%氧濃度)或常氧條件下培養(yǎng)72h,每組20皿。將培養(yǎng)上清高速離心收獲MV。計(jì)數(shù)培養(yǎng)后貼壁細(xì)胞,并測(cè)定MV蛋白質(zhì)含量。電子顯微鏡觀察MV的形態(tài)以鑒定MV。流式細(xì)胞術(shù)分析MV的表面標(biāo)志。在臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系中,加入不同來(lái)源的MV(10μg/ml),培養(yǎng)72 h后利用MTT實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞增殖活性。結(jié)果表明:多數(shù)MSC釋放的MV直徑100 nm,在電子顯微鏡下呈特征性的中空膜樣結(jié)構(gòu)。MV表達(dá)CD29、CD44、CD73和CD105,不表達(dá)CD31和CD45。在常氧含血清、常氧無(wú)血清、低氧含血清和低氧無(wú)血清條件下,臺(tái)盼藍(lán)抵抗的貼壁細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)分別為4.1、1.8、5.8和3.7,計(jì)算108細(xì)胞釋放的MV蛋白含量分別為463.48±138.74、1604.07±445.28、2389.64±476.75和3141.18±353.01μg。MTT實(shí)驗(yàn)表明,低氧條件下獲得的MV具有更好的促內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用。結(jié)論:低氧可促進(jìn)MSC釋放MV,低氧和無(wú)血清培養(yǎng)MSC可能是制備MSC-MV的適宜條件。
【作者單位】： 廣州市開(kāi)發(fā)區(qū)醫(yī)院南方生物治療中心;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)血液學(xué)研究室;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 間充質(zhì)干細(xì)胞 膜微囊
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30971068) 廣州開(kāi)發(fā)區(qū)科技局課題(2009Q-P081;2010Q-P035)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.28
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種成體干細(xì)胞,具有很強(qiáng)的體外增殖能力、對(duì)各種免疫細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用和向成骨細(xì)胞、成脂細(xì)胞及成軟骨細(xì)胞的分化功能[1-2]。MSC用于治療免疫相關(guān)性疾病和骨關(guān)節(jié)損傷等多種疾病已進(jìn)入臨床試驗(yàn)[3]。MSC也有很強(qiáng)的促血管再生作用。基于此,人們已經(jīng)開(kāi)展了

【共引文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1009797