大鼠視網(wǎng)膜、視神經(jīng)冰凍切片適宜厚度探索
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【摘要】:目的針對(duì)大鼠眼球冰凍切片難度高,各研究對(duì)眼球冰凍切片厚度差異較大的問題,探索大鼠視網(wǎng)膜、視神經(jīng)冰凍切片適宜的厚度.方法將24只SD大鼠隨機(jī)分為3組,使用傳統(tǒng)的石蠟切片行HE染色做對(duì)照,分別對(duì)不同厚度的冰凍切片做HE染色和FITC-lectin熒光染色進(jìn)行觀察(5μm、6μm、8μm、10μm、12μm、15μm,n=8).結(jié)果視網(wǎng)膜冰凍切片HE染色顯示6μm和8μm的大鼠視網(wǎng)膜各層細(xì)胞可看到完整細(xì)胞,密疏適宜,胞核清楚,核膜光滑完整,神經(jīng)纖維層厚度均勻;6μm視神經(jīng)冰凍切片HE染色顯示視神經(jīng)纖維排列密集、規(guī)則,染色均勻;免疫組化染色結(jié)果顯示5μm、6μm和8μm的大鼠視網(wǎng)膜冰凍切片F(xiàn)ITC-lectin熒光染色后層次清晰,lectin陽性細(xì)胞呈綠色分枝狀,在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及內(nèi)網(wǎng)狀層清晰可見,亦可在外網(wǎng)狀層看到少量綠色lectin陽性細(xì)胞,10μm及15μm的大鼠視網(wǎng)膜由于各層細(xì)胞重疊嚴(yán)重,無法看到綠色lectin陽性細(xì)胞.6μm的視神經(jīng)冰凍切片F(xiàn)ITC-lectin熒光染色顯示清晰可見的活化小膠質(zhì)細(xì)胞,胞體變肥大,突起縮短,呈阿米巴樣變化.結(jié)論 6μm的視神經(jīng)冰凍切片以及6~8μm的視網(wǎng)膜冰凍切片,可以得到重復(fù)性切片,也可以達(dá)到理想的免疫組化染色效果.
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 視網(wǎng)膜 視神經(jīng) 冰凍切片 厚度
【基金】:云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2013FB107,2013FB150)
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: Exploration on Suitable Thickness of Rat Retina and OpticNerve Frozen Sections在對(duì)眼科疾病(如糖尿病性視網(wǎng)膜病變、青光眼等)的研究中,視網(wǎng)膜視神經(jīng)是常見的研究對(duì)象.大鼠因其晶體大而韌、鞏膜硬、虹膜軟,視網(wǎng)膜疏松、對(duì)光敏感,常作為眼底疾病方面研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[1].但
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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3 張婉儀;胡W,
本文編號(hào):1006214
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