發(fā)布時間：2021-04-29 11:18

　　目的研究絲素蛋白/納米羥基磷灰石復合材料與兔骨髓間充質(zhì)干細胞體外復合培養(yǎng)的結(jié)和程度及構(gòu)建組織工程骨的可行性方法第一步：使用全骨髓法體外分離純化得到兔骨髓間充質(zhì)干細胞,經(jīng)傳代培養(yǎng),以細胞數(shù)為縱軸,時間為橫軸,繪制生長曲線。第二步：判斷所培養(yǎng)細胞是否為兔BMSC。方法是依據(jù)生長曲線取增值能力最強的一代骨髓間充質(zhì)干細胞進行成骨誘導分化,顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化,然后堿性磷酸酶染色檢驗。結(jié)合兩者判斷是否為兔BMSC。第三步：將兔BMSC與SF/nHA在體外共同培養(yǎng),構(gòu)建組織工程骨模型,通過顯微鏡及掃描電鏡觀察細胞與復合材料體外結(jié)合程度,并建立對比組（兔BMSC與骨誘導人工骨）,選幾個不同（2d,5d,2w）時間點,觀察結(jié)合程度有何差異。第四步：再將從兩種材料洗脫下來的細胞接種培養(yǎng),與同條件下培養(yǎng)的正常的細胞作為對照,進行細胞形態(tài)和生長觀察,評價復合材料的生物相容性。結(jié)果1、使用全骨髓法體外分離純化得到兔骨髓間充質(zhì)干細胞,經(jīng)傳代培養(yǎng),進行成骨誘導分化,顯微鏡下觀察細胞形態(tài)呈多角形及圓錐形,然后堿性磷酸酶染色陽性。通過細胞形態(tài)、成骨誘導以及堿性磷酸酶染色可以證明本實驗所培養(yǎng)的細胞是兔BMSC。2、... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
前言
第二章 材料與方法
    2.1 動物及藥物
    2.2 主要試劑
    2.3 主要設備
    2.4 實驗步驟
    2.5 統(tǒng)計學處理
第三章 結(jié)果
    3.1 兔骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)培養(yǎng)
    3.2 BMSC生長曲線描繪
    3.3 BMSC成骨誘導后ALP染色
    3.4 粘附細胞數(shù)量計數(shù)
    3.5 成骨細胞形態(tài)學觀察
    3.6 在掃描電鏡下觀察兩種材料上細胞的形態(tài)
第四章 討論
    4.1 BMSC是具有應用前景的種子細胞
    4.2 MSCs的分離、培養(yǎng)方法
    4.3 細胞的鑒定
    4.4 復合材料的生物相容性
    4.5 SF/nHA與兔BMSC構(gòu)建組織工程骨的評價
第五章 結(jié)論
附圖
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3167431