目的通過生物信息學(xué)方法分析甲型流感病毒H5/H7/H9及N2/N6/N9基因非翻譯區(qū)（UTR）多態(tài)性位點,利用自主改造的RNA聚合酶Ⅰ熒光報告系統(tǒng)為骨架,構(gòu)建含有H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR隨機(jī)突變位點的隨機(jī)突變基因庫。從HA/NA-UTR隨機(jī)突變庫中挑選突變株,定性及定量地分析目報告基因表達(dá)情況,以此探究UTR多態(tài)性位點突變對甲型流感病毒HA/NA基因表達(dá)影響。方法1.流感病毒HA/NA基因UTR序列特征分析;2.RNA聚合酶I熒光報告系統(tǒng)的改造;3.H5/H7H9及N2/N6/N9-UTR隨機(jī)突變基因庫構(gòu)建;4.報告基因上調(diào)篩選及鑒定。結(jié)果1.系統(tǒng)地分析深圳市及全球H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR序列特征,歸納出UTR序列突變位點特征;2.改造的RNA聚合酶I系統(tǒng)有效驅(qū)動報告基因EGFP表達(dá),能以此用作UTR突變的功能性研究;3.成功構(gòu)建H5/H7/H9及N2/N6/N9-UTR基因突變庫,突變庫容量達(dá)建庫要求;4.經(jīng)檢驗,實驗組H7-10/H9-1/N2-5-UTR突變能顯著上調(diào)報告基因表達(dá)。結(jié)論經(jīng)改造獲得不含任何外源性RNA啟動子的RNA聚合酶I熒光報告... 

【文章來源】：第九屆中國臨床微生物學(xué)大會暨微生物學(xué)與免疫學(xué)論壇論文集中國微生物學(xué)會臨床微生物學(xué)專業(yè)委員會會議論文集

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