瘧疾是一類嚴(yán)重危害人類健康的熱帶傳染性疾病，在全球有著很高的發(fā)病率和致死率，而紅內(nèi)期疫苗是瘧疾防治中最經(jīng)濟有效的方式之一。雖然全世界科學(xué)家付出了極大的努力，但到目前為止，仍然沒有一種有效的紅內(nèi)期亞單位疫苗問世。目前紅內(nèi)期亞單位疫苗存在的主要問題在于瘧原蟲抗原的高變異性及裂殖子表面蛋白的多態(tài)性。最近，紅內(nèi)期全蟲疫苗被證實它能夠保護宿主抵抗多種瘧原蟲攻擊，而且其保護作用主要由CD4+T細(xì)胞所介導(dǎo)，這也許能為紅內(nèi)期亞單位疫苗的設(shè)計提供一種新的策略。然而，紅內(nèi)期全蟲疫苗中瘧原蟲特異性CD4+T細(xì)胞活化的具體機制仍然很不清楚。補體作為天然免疫系統(tǒng)十分重要的組成部分，最近的研究表明，補體在適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)中同樣發(fā)揮著不可替代的作用。比如，補體C5a通過調(diào)節(jié)DC功能間接影響CD8+T細(xì)胞活化。然而，C5a在全蟲疫苗誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞反應(yīng)中的作用還不清楚。在本研究中，我們首先觀察紅內(nèi)期全蟲疫苗免疫后，WT和C5aR-/-小鼠體內(nèi)補體活化及C5a產(chǎn)生情況，并確認(rèn)C5a/C5aR信號是否在紅內(nèi)期全蟲疫苗中發(fā)揮作用。然后我們檢測兩種小鼠免疫后體內(nèi)抗體及CD4+T細(xì)胞功能是否發(fā)生改變，并采用過繼轉(zhuǎn)移實驗證實是... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ELISA檢測免疫小鼠血清中的C5a濃度Fig1-1：C5alevelinserumofbothimmunizedWTandC5sR-/-mice

圖 1-2：pRBC 攻擊后小鼠原蟲血癥及存活率的變化Fig1-2：Parasitemia and survival rate in mice after pRBC challenging討 論為，紅內(nèi)期亞單位疫苗失敗的主要原因在于其針對的瘧原蟲表面態(tài)性[25]。最近，Good 等研究證實，低劑量反復(fù)凍融的 pRBC 與免疫，能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生強有力的保護性免疫應(yīng)答。我們的研究 裂解產(chǎn)物免疫小鼠，能夠為小鼠提供保護性免疫。滅活紅內(nèi)期全疫依賴于 CD4+T 細(xì)胞反應(yīng)，其通過分泌 IFN-γ 和 NO 發(fā)揮保護生抗體的現(xiàn)有紅內(nèi)期瘧疾亞單位疫苗不同的是，滅活紅內(nèi)期全蟲胞的靶抗原表位肽非常保守，能夠?qū)Χ喾N瘧原蟲提供交叉免疫保略也許能為亞單位疫苗的設(shè)計提供新的思路。為天然免疫十分重要的組成部分，能夠在機體感染病毒或細(xì)菌的

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié) 果免疫小鼠血清瘧原蟲特異性抗體滴度及功能檢測主保護性免疫中，瘧原蟲特異性抗體扮演著十分重要的角色[31-32]，全蟲疫苗模型中 IgG 的作用，我們收集免疫小鼠血清，采用 ELIS異性抗體 IgG 及其亞類 IgG1、IgG2a 的滴度。結(jié)果如圖所示(圖體總 IgG 及亞類 IgG2a 滴度相同。雖然 C5aR-/-免疫小鼠血清 I鼠低一個數(shù)量級，但沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。為了進一步確定內(nèi)期全蟲疫苗中的作用，我們將兩種小鼠的免疫血清過繼轉(zhuǎn)移至17XL 進行攻擊。與過繼轉(zhuǎn)移 Na ve 小鼠血清相比，過繼轉(zhuǎn)移免疫鼠的血清雖能輕度降低 Na ve 小鼠的原蟲血癥，但并不能提供保護，所有小鼠的原蟲血癥可高達(dá) 60%左右，并于第 10 天全部死亡


本文編號：3093220