目的：考察自制的陽離子脂質體作為載體，在小鼠體內遞送DNA及RNA的效果及其體內安全性。方法：（1）以熒光素酶為目的基因，分別以自制的8種陽離子脂質體為載體，對攜帶熒光素酶基因的質粒pGFP-N2在小鼠體內進行轉染。通過Western Blotting檢測轉染后小鼠肺和肝臟中熒光素酶的表達，評價陽離子脂質體在小鼠體內遞送DNA的效果。（2）以自制的4種陽離子脂質體為載體轉染小鼠，對載脂蛋白B（Apoplipoprotein B，Apo B）進行體內RNA干擾。RT-PCR檢測小鼠肝臟中ApoBmRNA的表達，ELISA、Western Blotting檢測小鼠肝臟及血漿中Apo B蛋白的表達，評價陽離子脂質體在小鼠體內遞送siRNA的效果。（3）在進行體內轉染的同時通過考察小鼠的體重變化、內臟變化、死亡率等指標評價所用陽離子脂質體的體內安全性。結果：（1）以自制的8種陽離子脂質體9、10、17、19、20、21、22、CD01為載體進行體內DNA轉染，通過Western Blotting檢測到轉染組小鼠肝臟和肺中有熒光素酶蛋白的表達，表明所考察的陽離子脂質體均有體內遞送DNA的作用，且... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

脂質體CD01為轉染載體時小鼠肝臟中熒光素酶蛋白的表達

圖 2 脂質體 10 為轉染載體時小鼠肺中熒光素酶蛋白的表達Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carriertern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Ncontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.以脂質體 10 為載體殼聚糖為促進劑轉染時小鼠肝和肺組織中熒達一步考察以陽離子脂質體 10 作為載體，殼聚糖為粘附劑和吸收促的影響。轉染 48h，以 Western Blotting 的方法檢測小鼠肝（圖 3A 3B）中熒光素酶蛋白的表達，結果表明殼聚糖對轉染具有促進作，加入殼聚糖后熒光素酶蛋白的表達量高于僅用脂質體 10 的情況

圖 2 脂質體 10 為轉染載體時小鼠肺中熒光素酶蛋白的表達Fig.2 Expression of luciferase in mice lungs using liposome 10 as a carrierstern Blotting analysis for luciferase in lungs of the tested mice. M:luciferase;N:Negcontrol;1,2,3,4:liposome 10;5: Adding no carrier.3 以脂質體 10 為載體殼聚糖為促進劑轉染時小鼠肝和肺組織中熒光達進一步考察以陽離子脂質體 10 作為載體，殼聚糖為粘附劑和吸收促進的影響。轉染 48h，以 Western Blotting 的方法檢測小鼠肝（圖 3A） 3B）中熒光素酶蛋白的表達，結果表明殼聚糖對轉染具有促進作用，加入殼聚糖后熒光素酶蛋白的表達量高于僅用脂質體 10 的情況。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]尾靜脈大容量快速注射法介導的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝內的高效表達[J]. 賀晨霞,馮登敏,陳立,陳浩明,姚紀花,沈琦,盧大儒,薛京倫,吳文君,丁友法.  科學通報. 2003(05)



本文編號：3088127