目的檢測成纖維細(xì)胞生長因子受體（fibroblast growth factor receptors,FGFRs）1-3在成骨分化不同階段的表達(dá)變化,并明確FGFR信號在成骨分化中的重要作用。方法利用原代成骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞系MC3T3-E1進(jìn)行成骨誘導(dǎo),通過形態(tài)觀察、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色和茜素紅染色鑒定細(xì)胞分化情況,qRT-PCR和Western blot檢測成骨分化相關(guān)基因和FGFR1-3的表達(dá),并通過阻斷FGFR信號觀察成骨細(xì)胞分化的變化。結(jié)果原代成骨細(xì)胞ALP染色和茜素紅染色陽性,成骨分化相關(guān)基因COL 1α、RUNX2、OPN表達(dá)增加,在成骨細(xì)胞系MC3T3-E1實驗中得到了類似結(jié)果,而且FGFR1、FGFR2和FGFR3在成骨分化過程中表達(dá)增加,阻斷FGFR信號可以顯著抑制成骨分化,提示FGFR信號參與了成骨細(xì)胞分化調(diào)控。結(jié)論 FGFR信號促進(jìn)成骨細(xì)胞成骨分化。 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2019,41(24)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

倒置顯微鏡下細(xì)胞貼壁后形態(tài) (×40)

使用FGFR信號阻斷劑后,原代成骨細(xì)胞通過ALP染色均發(fā)現(xiàn)藍(lán)紫色變淺,茜素紅染色發(fā)現(xiàn)紅色礦化結(jié)節(jié)形成減少。提取平行培養(yǎng)細(xì)胞RNA,qRT-PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,加入FGFR信號阻斷劑以后,成骨細(xì)胞成骨分化相關(guān)基因表達(dá)明顯降低(P<0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。平行培養(yǎng)的MC3T3-E1細(xì)胞系進(jìn)行相同處理后,表現(xiàn)為一致的趨勢(圖5)。這說明阻斷FGFRs信號可抑制成骨細(xì)胞成骨分化能力。圖3 qRT-PCR檢測原代成骨細(xì)胞和MC3T3-E1成骨誘導(dǎo)處理后對成骨分化基因的表達(dá)情況

qRT-PCR檢測原代成骨細(xì)胞和MC3T3-E1成骨誘導(dǎo)處理后對成骨分化基因的表達(dá)情況


本文編號：3072278