【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)旨在研究長鏈脂肪酸受體(GPR120)對表達(dá)于巨噬細(xì)胞(MΦ)炎性細(xì)胞因子表達(dá)以及吞噬功能的影響并探討可能的信號機(jī)制。方法:1.8-10周Balb/c小鼠應(yīng)用RT-PCR對腹腔和肺GPR120和炎性細(xì)胞因子的表達(dá)水平進(jìn)行了檢測,并對GPR120與細(xì)胞因子表達(dá)的相關(guān)性進(jìn)行分析。2.培養(yǎng)12小時Balb/c小鼠肺泡MΦ分對照組、TUG-891(GPR120選擇性激動劑)處理組加入粒徑1.0um熒光微球(紅色熒光),待兩組細(xì)胞吞噬4小時后,流式細(xì)胞儀對兩組細(xì)胞吞噬情況進(jìn)行檢測分析。3.培養(yǎng)12小時Balb/c小鼠肺泡MΦ分對照組和TUG-891組FLOU3鈣染料對肺泡MΦ胞內(nèi)鈣染料染色,細(xì)胞置于活細(xì)胞工作站內(nèi),運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡分別對對照組和TUG-891組肺泡MΦ熒光強(qiáng)度進(jìn)行記錄,對細(xì)胞內(nèi)鈣的變化進(jìn)行了測量和分析。結(jié)果:1.觀察到兩組MΦ內(nèi)都有GPR120表達(dá),但肺泡MΦ的GPR120表達(dá)水平顯著高于腹腔MΦ(t=9.712,P㩳0.01)。IL-1(t=7.771,P㩳0.01).和TNF-α(t=5.993,P㩳0.01)的表達(dá)水平在肺泡MΦ也顯著高于腹腔MΦ,IL-10(t=6.009,P㩳0.01.)和IL-6(t=7.027,P㩳0.01.)的表達(dá)水平在肺泡MΦ顯著低于腹腔MΦ。腹腔GPR120表達(dá)水平與IL-10(R=0.928)、IL-6(R=0.95)、TNF-α(R=0.93)呈正相關(guān),與IL-1負(fù)相關(guān)(R=-0.914,)。肺MΦ的GPR120表達(dá)水平與IL-1(R=0.911)、IL-6(R=0.76)、TNF-α(R=0.836)呈正相關(guān),與IL-10負(fù)相關(guān)(R=-0.955)。2.與對照組相比,激動劑組肺泡MΦ吞噬熒光微球的能力明顯減弱(P㩳0.01)。3.相較于對照組,激動劑在肺泡MΦ內(nèi)會引起了一過性胞內(nèi)鈣增高(P㩳0.05)。結(jié)論:GPR120受體在巨噬細(xì)胞上表達(dá),其在巨噬細(xì)胞功能調(diào)節(jié)中的作用主要表現(xiàn)為抑制炎癥相關(guān)因子的表達(dá)并且抑制吞噬,細(xì)胞內(nèi)鈣變換可能參與其胞內(nèi)部信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。
【圖文】：

功能研究方面兩種重要的工具，據(jù)此對比我們認(rèn)為 TUG-891 是現(xiàn)有的激理想的一種，在實(shí)驗(yàn)中選擇了 TUG-891 作為 GPR120 特異性激動劑。這現(xiàn)和闡明，為 GPR120 的功能研究提供了有力手段，也是本實(shí)驗(yàn)選擇 TU特異性激動劑的依據(jù)。四.GPR120 的功能及胞內(nèi)信號機(jī)制:關(guān)于 GPR120 對細(xì)胞功能的影響主要集中在以下方面：在味蕾細(xì)胞的主要功能與飲食脂肪的味覺信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用有關(guān)，有報(bào)道人和嚙齒類動物中可能參與脂肪酸味覺轉(zhuǎn)導(dǎo)[26,27]，進(jìn)而影響人和嚙齒動物的食物選擇，另外調(diào)節(jié)胃腸肽類激素、膽囊收縮素（CCK）分泌、葡萄糖依賴性促胰島素分泌分泌、腸促胰島素激素（GLP）分泌、在脂肪形成和影響細(xì)胞增殖方面等實(shí)驗(yàn)結(jié)果所涉及的細(xì)胞內(nèi)部信號轉(zhuǎn)到通路各不相同，，有研究已報(bào)道 GPR12轉(zhuǎn)導(dǎo)通路圖[28]，見圖 1

所收集細(xì)胞呈陽性染色（圖2A、B）。收集的腹腔與肺泡 MΦ均呈圓形，腹腔 MΦ平均面積為 82.6±9.4μm2，而肺泡 MΦ平均面積為 121.8±17.8μm2,二者具有明顯差異。流式分析表明所收集腹腔細(xì)胞和肺泡細(xì)胞的 CD68 陽性比例分別為 94%±5%和 97%±3%，表明所收集的腹腔與肺泡細(xì)胞為高純度 MΦ（圖 2C、D）。具體結(jié)果如圖 2 所示。圖 2 腹腔和肺泡 MΦ的鑒定分析A：腹腔 MΦ的 CD68 染色；B：肺泡 MΦ的 CD68 染色；C：免疫染色的陰性對照；D：腹腔 MΦ
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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本文編號：2680988