一株感染銅綠假單胞菌的雙鏈RNA噬菌體PaP6的分離和鑒定
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【摘要】:【目的】鑒定一株新分離的銅綠假單胞菌噬菌體PaP6的生物學特性。【方法】利用銅綠假單胞菌臨床分離株P(guān)A038為宿主,從西南醫(yī)院污水中分離得到一株裂解性噬菌體PaP6,觀察其噬斑特點;氯化銫密度梯度離心純化噬菌體顆粒后,用透射電子顯微鏡觀察噬菌體形態(tài);提取PaP6基因組,通過DNA酶和RNA酶酶切,做基因組酶切圖譜分析;按照感染復(fù)數(shù)(MOI)分別為10、1、0.1、0.01、0.001和0.000 1加入噬菌體和宿主菌,裂解細菌后,測定噬菌體滴度;以MOI=10的比例加入噬菌體和宿主菌,繪制一步生長曲線;用112株銅綠假單胞菌臨床分離株檢測PaP6宿主譜!窘Y(jié)果】PaP6的噬斑直徑約2 mm-4 mm,圓形透明,邊緣清晰;PaP6噬菌體呈多面體立體對稱的頭部,直徑約45 nm;酶切圖譜表明PaP6基因組對DNase不敏感,對RNase敏感,未酶切基因組具有3節(jié)段雙鏈RNA(dsRNA),長度分別約為9.0、4.5、3.5 kb,共約17 kb;當MOI為0.1時PaP6感染其宿主菌產(chǎn)生的子代噬菌體滴度最高,達到3.4×109 PFU/m L;用一步生長曲線描繪了其生長特性;PaP6可以感染40.1%的臨床分離株,是一株比較廣譜的噬菌體。【結(jié)論】首次報道了一株銅綠假單胞菌的ds RNA分節(jié)段噬菌體,分類學上屬于囊病毒科,該噬菌體具有較廣的宿主譜,在噬菌體治療領(lǐng)域具有應(yīng)用前景。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學基礎(chǔ)部微生物教研室;菲吉樂科生物科技有限公司;
【基金】:國家自然科學基金項目(No.31570173)~~
【分類號】:R378
【正文快照】: 銅綠假單胞菌是一種常見的機會致病菌,常導(dǎo)致囊性纖維化病人的肺部感染以及免疫力低下人群的感染,如燒傷和艾滋病人[1]。隨著抗生素的廣泛應(yīng)用甚至濫用,銅綠假單胞菌的耐抗生素現(xiàn)象越來越普遍,多重耐藥的銅綠假單胞菌越來越常見于臨床,給臨床治療帶來巨大挑戰(zhàn)。因此,噬菌體治
【參考文獻】
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【共引文獻】
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4 張克斌,陳志瑾,金曉琳,饒賢才,胡福泉;銅綠假單胞菌噬菌體的分離鑒定及耐噬菌體突變頻率測定[J];微生物學通報;2002年01期
,本文編號:1252047
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