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流式細(xì)胞術(shù)測定多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞表面標(biāo)記的研究
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本站編輯：admin 日期： 2010-08-12 18:45 點(diǎn)擊：次
【中文摘要】:
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【中文摘要】背景多發(fā)性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是以骨髓內(nèi)漿細(xì)胞惡性增生,分泌單克隆免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)或輕鏈(Light chain,L),并伴有正常免疫球蛋白減少以及廣泛溶骨病變和(或)骨質(zhì)疏松為特征的腫瘤。它常見于中、老年人,隨著年齡增長,其發(fā)病率也明顯升高。既往曾誤認(rèn)為MM是一種少見病,近年來,隨著人口的老齡化和人們對此病認(rèn)識及診斷水平的提高,MM病例數(shù)顯著增加。目前在我國無MM的流行病學(xué)資料,但隨著我國人口老齡化的發(fā)展,MM的發(fā)病率也有逐年增高的趨勢,它必將對我國人口的健康構(gòu)成越來越嚴(yán)重的威脅。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是確診MM的重要依據(jù)之一,但是MM細(xì)胞有灶性分布的特征,部分疑似病例的骨髓標(biāo)本中,漿細(xì)胞比例難以達(dá)到形態(tài)學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn),且部分骨髓瘤細(xì)胞與正常漿細(xì)胞形態(tài)相似,很難區(qū)別。近年來隨著單克隆抗體(Monoclonal antibody,McAb)的應(yīng)用及流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry,FCM)的快速發(fā)展,流式細(xì)胞術(shù)-免疫學(xué)方法已經(jīng)成為白血病診斷和分型的重要依據(jù),它能快速、準(zhǔn)確、客觀的反映白血病細(xì)胞的生物學(xué)特性,提高了白血病的診斷水平,并能指導(dǎo)治療和提示預(yù)后。但是,利用流式細(xì)胞術(shù)對MM進(jìn)行免疫學(xué)分型還處于研究、探索階段。國內(nèi)對MM免疫表型研究的報(bào)道較少,且多以白血病免疫分型經(jīng)典方法CD45/SSC(Side scatter,側(cè)向角散射)設(shè)門,該設(shè)門方法易受漿細(xì)胞(Plasma cells,PCs)CD45表達(dá)變異度大和有核紅細(xì)胞的影響。因此,有必要研究一種更為可靠的流式細(xì)胞學(xué)的設(shè)門方法。目的本試驗(yàn)通過CD38/SSC設(shè)門的FCM方法,檢測MM胞膜上的相關(guān)抗原分子,探討改善MM檢測的方法,為臨床提供更加準(zhǔn)確的早期診斷、治療指導(dǎo)及預(yù)后判斷的依據(jù)。方法研究經(jīng)骨髓細(xì)胞學(xué)、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)、血清學(xué)等指標(biāo)確診的MM患者37例,另取20例漿細(xì)胞反應(yīng)性增多癥(Reactive plasmacytosis,RP)患者為對照組,分別抽取骨髓液,用三色熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測骨髓瘤細(xì)胞和正常漿細(xì)胞表面的免疫表型。主要單克隆抗體有:CD19、CD56、CD13、CD138、HLA-DR、CD33、CD64、CD34、CD8、CD3、CD5、CD10、CD1a、CD14、CD40、CD4、CD25、CD20、CD7、CD45、CD49e。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。結(jié)果1、所有標(biāo)本經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)CD38/SSC設(shè)門后可見到一群CD38陽性細(xì)胞,比例為0.5%～80.0%。2、多數(shù)MM表型為CD38~+CD19~-CD56~+(89.2%),CD56的表達(dá)在初治或未緩解組明顯比緩解組高,但發(fā)生髓外侵犯時(shí)反而明顯降低。3、骨髓瘤細(xì)胞CD40、CD138的表達(dá)明顯高于對照組正常漿細(xì)胞的表達(dá)。4、幼稚漿細(xì)胞/漿細(xì)胞比值與CD45~+CD49e~+細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān),根據(jù)CD45~+CD49e~+細(xì)胞的比例可大致判斷骨髓內(nèi)漿細(xì)胞的分化程度。結(jié)論1、利用CD38/SSC設(shè)門方法的流式細(xì)胞術(shù)對MM進(jìn)行免疫分型,根據(jù)細(xì)胞表面抗原的異質(zhì)性,可鑒別良、惡性漿細(xì)胞,為判斷預(yù)后及靶向治療提供依據(jù)。2、以細(xì)胞表型為CD38~+CD19~-CD56~+者作為FCM法檢出MM陽性,有很高的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值,而且檢測所需時(shí)間短,臨床實(shí)用性強(qiáng),有望作為MM的診斷方法和早期篩選方法,在具備流式細(xì)胞儀的大醫(yī)院推廣使用。
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