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Survivin及其異構(gòu)體Survivin
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本站編輯：admin 日期： 2010-08-26 21:48 點擊：次
【中文摘要】:
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【中文摘要】目的膀胱癌的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)占全身腫瘤的第八位,是我國泌尿外科最常見的惡性腫瘤,高復發(fā)率是其特點,并且有10%-20%的淺表性膀胱癌將轉(zhuǎn)變成浸潤性。目前尚缺乏一種比較客觀的檢測方法能較準確地預示膀胱腫瘤的復發(fā)及其進展情況。國內(nèi)外研究已表明凋亡抑制基因survivin在膀胱腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,但對其異構(gòu)體的研究較少。本研究承接前期實驗成果,干擾后部分腫瘤的治療不佳,探討survivin基因及其異構(gòu)體survivin-2B和survivin-△Ex3在膀胱移行細胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,TCC)中的表達情況,根據(jù)隨訪資料,了解他們與膀胱腫瘤的發(fā)生發(fā)展和預后復發(fā)之間的關(guān)系。方法選取手術(shù)切除的原發(fā)膀胱移行細胞癌新鮮標本60例,膀胱良性疾病患者病變膀胱組織標本12例作為對照。修剪標本至0.2cm~3大小左右,加入Trizol試劑1ml,一步法抽提RNA,加入DEPC水溶解,將RNA濃度調(diào)整至0.5μg/μl。應(yīng)用實時定量RT-PCR方法檢測survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3基因mRNA的表達情況。三者PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)純化后測序、鑒定。實驗組中根據(jù)病理分級分組:Ⅰ級19例,Ⅱ級29例,Ⅲ級12例;根據(jù)腫瘤浸潤程度分A、B兩組:A非肌層浸潤(包括T_a和T_1)43例,B肌層浸潤(T_2)17例�；颊唠S訪時間4-24個月。結(jié)果Survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA在TCC組織中均存在表達,相對表達量分別為:0.333±0.163,0.056±0.017,0.124±0.096,在對照組中分別有3例和4例標本存在survivin和survivin-△Ex3 mRNA的微量表達,分別為:0.021±0.031,0.003±0.004,12例均表達survivin-2B mRNA,為:0.007±0.004,實驗組survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA的表達量與對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Survivin mRNA在不同病理分級中的表達量為:Ⅰ級0.170±0.046,Ⅱ級0.353±0.069,Ⅲ級0.543±0.179;不同浸潤深度中為:A0.270±0.108,B0.494±0.170,不同病理分級、不同浸潤深度中survivin mRNA的表達量差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),并且呈正性相關(guān)(0＜r′_s＜1,P＜0.05)。Survivin-2B mRNA的表達量為:Ⅰ級0.074±0.015,Ⅱ級0.051±0.011,Ⅲ級0.040±0.006;A0.062±0.017,B0.043±0.009。不同病理分級、不同浸潤深度中survivin-2B mRNA的表達量差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),并且呈負性相關(guān)(-1＜r′_s＜0,P＜0.05)。Survivin-△Ex3 mRNA的表達量為:Ⅰ級0.082±0.014,Ⅱ級0.086±0.011,Ⅲ級0.285±0.115;A0.085±0.013,B0.225±0.135。在病理分級Ⅰ、Ⅱ級與Ⅲ級以及不同浸潤深度中survivin-△Ex3 mRNA表達量差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),并存在正相關(guān)趨勢(0＜r′_s＜1,P＜0.05)。Survivin-2B/survivin的值在不同病理分級中為:Ⅰ級0.465±0.156,Ⅱ級0.149±0.037,Ⅲ級0.083±0.033;不同浸潤深度中為:A0.290±0.190,B0.099±0.042。不同病理分級、不同浸潤深度中survivin-2B/survivin的值差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),并且存在負相關(guān)趨勢(-1＜r′_s＜0,P＜0.05)。Survivin-△Ex3/survivin的值在不同病理分級、不同浸潤深度中差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。在獲得隨訪的47例患者中,有三例復發(fā)TCC(兩例Ⅱ級,一例Ⅲ級),復發(fā)時間分別為:5個月,11個月,9個月。三例復發(fā)患者原膀胱腫瘤標本中survivin-2B/survivin的值均較同級別明顯下降,分別為:0.052,0.075,0.051。結(jié)論1.在膀胱癌腫瘤組織中存在survivin及其兩個異構(gòu)體survivin-△Ex3和survivin-2B mRNA的表達。2.Survivin的表達量隨膀胱腫瘤病理分級和惡性程度的增加而增加,說明survivin表達量的增高可能預示TCC患者預后較差。3.異構(gòu)體survivin-△Ex3和survivin-2B在TCC的發(fā)生發(fā)展中可能存在不同的功能和作用,survivin-△Ex3在高級別分化差的腫瘤中表達量明顯增高,與腫瘤的病理分級(Ⅱ,Ⅲ級)和浸潤深度呈正性相關(guān),而survivin-2B與腫瘤的病理分級和浸潤深度成負性相關(guān)。說明survivin-△Ex3和survivin-2B在評估TCC患者預后具有一定價值。4.復發(fā)患者TCC標本中survivin-2B/survivin的值較同級別膀胱腫瘤明顯降低,提示survivin-2B/survivin的值下降預示患者復發(fā)風險增高,應(yīng)用實時定量RT-PCR法同時檢測膀胱腫瘤組織中survivin和survivin-2B的表達量,能為預測TCC的復發(fā)提供一個有價值的指標,從而為臨床制定患者隨訪時間和術(shù)后化療方案提供一個客觀的參考。5.Survivin-2B在膀胱良性病變中也存在微量表達,提示survivin-2B的表達變化可能與膀胱上皮細胞的增殖及分化狀態(tài)有關(guān),在調(diào)節(jié)膀胱上皮細胞生長、分化和惡性轉(zhuǎn)化中可能發(fā)揮不同作用,在TCC的發(fā)生發(fā)展中可能存在雙向調(diào)節(jié)作用。6.聯(lián)合檢測survivin及其異構(gòu)體survivin-2B和survivin-△Ex3在TCC組織中的表達量,對判斷膀胱腫瘤的惡性程度以及術(shù)后復發(fā)具有潛在的應(yīng)用價值。
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