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Survivin及其異構(gòu)體Survivin
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本站編輯：admin 日期： 2010-08-26 21:48 點(diǎn)擊：次
【中文摘要】:
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膀胱移行細(xì)胞癌p21WAF1/CIP1mRNA及蛋白
膀胱腫瘤尿脫落細(xì)胞端粒酶活性的實(shí)驗(yàn)研
基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑在膀胱移行細(xì)
P16基因?qū)雽?duì)人膀胱癌細(xì)胞生長影響的
膀胱癌尿脫落細(xì)胞角蛋白20檢測(cè)及其臨床
膀胱癌相關(guān)NMPs分析及其與EGFR基因相互
原位雜交檢測(cè)DDX24新基因在膀胱癌的表
MMP_9、MMP_2及PCNA在膀胱移行細(xì)胞癌中
p16蛋白及PCNA在膀胱移行細(xì)胞癌中的表
P53、P21～（WAF1/CIP1）和Cyclin E基
CD15和nm23在膀胱移行細(xì)胞癌的表達(dá)及臨
p73蛋白及凋亡在膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)
膀胱移行細(xì)胞癌中一氧化氮合酶的表達(dá)及
P53和CD44_（v6）在膀胱移行細(xì)胞癌的表
一、TOPOⅡ與膀胱癌多藥耐藥性關(guān)系的實(shí)
【中文摘要】目的膀胱癌的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)占全身腫瘤的第八位,是我國泌尿外科最常見的惡性腫瘤,高復(fù)發(fā)率是其特點(diǎn),并且有10%-20%的淺表性膀胱癌將轉(zhuǎn)變成浸潤性。目前尚缺乏一種比較客觀的檢測(cè)方法能較準(zhǔn)確地預(yù)示膀胱腫瘤的復(fù)發(fā)及其進(jìn)展情況。國內(nèi)外研究已表明凋亡抑制基因survivin在膀胱腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,但對(duì)其異構(gòu)體的研究較少。本研究承接前期實(shí)驗(yàn)成果,干擾后部分腫瘤的治療不佳,探討survivin基因及其異構(gòu)體survivin-2B和survivin-△Ex3在膀胱移行細(xì)胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,TCC)中的表達(dá)情況,根據(jù)隨訪資料,了解他們與膀胱腫瘤的發(fā)生發(fā)展和預(yù)后復(fù)發(fā)之間的關(guān)系。方法選取手術(shù)切除的原發(fā)膀胱移行細(xì)胞癌新鮮標(biāo)本60例,膀胱良性疾病患者病變膀胱組織標(biāo)本12例作為對(duì)照。修剪標(biāo)本至0.2cm~3大小左右,加入Trizol試劑1ml,一步法抽提RNA,加入DEPC水溶解,將RNA濃度調(diào)整至0.5μg/μl。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法檢測(cè)survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3基因mRNA的表達(dá)情況。三者PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)純化后測(cè)序、鑒定。實(shí)驗(yàn)組中根據(jù)病理分級(jí)分組:Ⅰ級(jí)19例,Ⅱ級(jí)29例,Ⅲ級(jí)12例;根據(jù)腫瘤浸潤程度分A、B兩組:A非肌層浸潤(包括T_a和T_1)43例,B肌層浸潤(T_2)17例。患者隨訪時(shí)間4-24個(gè)月。結(jié)果Survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA在TCC組織中均存在表達(dá),相對(duì)表達(dá)量分別為:0.333±0.163,0.056±0.017,0.124±0.096,在對(duì)照組中分別有3例和4例標(biāo)本存在survivin和survivin-△Ex3 mRNA的微量表達(dá),分別為:0.021±0.031,0.003±0.004,12例均表達(dá)survivin-2B mRNA,為:0.007±0.004,實(shí)驗(yàn)組survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA的表達(dá)量與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Survivin mRNA在不同病理分級(jí)中的表達(dá)量為:Ⅰ級(jí)0.170±0.046,Ⅱ級(jí)0.353±0.069,Ⅲ級(jí)0.543±0.179;不同浸潤深度中為:A0.270±0.108,B0.494±0.170,不同病理分級(jí)、不同浸潤深度中survivin mRNA的表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),并且呈正性相關(guān)(0＜r′_s＜1,P＜0.05)。Survivin-2B mRNA的表達(dá)量為:Ⅰ級(jí)0.074±0.015,Ⅱ級(jí)0.051±0.011,Ⅲ級(jí)0.040±0.006;A0.062±0.017,B0.043±0.009。不同病理分級(jí)、不同浸潤深度中survivin-2B mRNA的表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),并且呈負(fù)性相關(guān)(-1＜r′_s＜0,P＜0.05)。Survivin-△Ex3 mRNA的表達(dá)量為:Ⅰ級(jí)0.082±0.014,Ⅱ級(jí)0.086±0.011,Ⅲ級(jí)0.285±0.115;A0.085±0.013,B0.225±0.135。在病理分級(jí)Ⅰ、Ⅱ級(jí)與Ⅲ級(jí)以及不同浸潤深度中survivin-△Ex3 mRNA表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),并存在正相關(guān)趨勢(shì)(0＜r′_s＜1,P＜0.05)。Survivin-2B/survivin的值在不同病理分級(jí)中為:Ⅰ級(jí)0.465±0.156,Ⅱ級(jí)0.149±0.037,Ⅲ級(jí)0.083±0.033;不同浸潤深度中為:A0.290±0.190,B0.099±0.042。不同病理分級(jí)、不同浸潤深度中survivin-2B/survivin的值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),并且存在負(fù)相關(guān)趨勢(shì)(-1＜r′_s＜0,P＜0.05)。Survivin-△Ex3/survivin的值在不同病理分級(jí)、不同浸潤深度中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在獲得隨訪的47例患者中,有三例復(fù)發(fā)TCC(兩例Ⅱ級(jí),一例Ⅲ級(jí)),復(fù)發(fā)時(shí)間分別為:5個(gè)月,11個(gè)月,9個(gè)月。三例復(fù)發(fā)患者原膀胱腫瘤標(biāo)本中survivin-2B/survivin的值均較同級(jí)別明顯下降,分別為:0.052,0.075,0.051。結(jié)論1.在膀胱癌腫瘤組織中存在survivin及其兩個(gè)異構(gòu)體survivin-△Ex3和survivin-2B mRNA的表達(dá)。2.Survivin的表達(dá)量隨膀胱腫瘤病理分級(jí)和惡性程度的增加而增加,說明survivin表達(dá)量的增高可能預(yù)示TCC患者預(yù)后較差。3.異構(gòu)體survivin-△Ex3和survivin-2B在TCC的發(fā)生發(fā)展中可能存在不同的功能和作用,survivin-△Ex3在高級(jí)別分化差的腫瘤中表達(dá)量明顯增高,與腫瘤的病理分級(jí)(Ⅱ,Ⅲ級(jí))和浸潤深度呈正性相關(guān),而survivin-2B與腫瘤的病理分級(jí)和浸潤深度成負(fù)性相關(guān)。說明survivin-△Ex3和survivin-2B在評(píng)估TCC患者預(yù)后具有一定價(jià)值。4.復(fù)發(fā)患者TCC標(biāo)本中survivin-2B/survivin的值較同級(jí)別膀胱腫瘤明顯降低,提示survivin-2B/survivin的值下降預(yù)示患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)增高,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法同時(shí)檢測(cè)膀胱腫瘤組織中survivin和survivin-2B的表達(dá)量,能為預(yù)測(cè)TCC的復(fù)發(fā)提供一個(gè)有價(jià)值的指標(biāo),從而為臨床制定患者隨訪時(shí)間和術(shù)后化療方案提供一個(gè)客觀的參考。5.Survivin-2B在膀胱良性病變中也存在微量表達(dá),提示survivin-2B的表達(dá)變化可能與膀胱上皮細(xì)胞的增殖及分化狀態(tài)有關(guān),在調(diào)節(jié)膀胱上皮細(xì)胞生長、分化和惡性轉(zhuǎn)化中可能發(fā)揮不同作用,在TCC的發(fā)生發(fā)展中可能存在雙向調(diào)節(jié)作用。6.聯(lián)合檢測(cè)survivin及其異構(gòu)體survivin-2B和survivin-△Ex3在TCC組織中的表達(dá)量,對(duì)判斷膀胱腫瘤的惡性程度以及術(shù)后復(fù)發(fā)具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
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