本文關(guān)鍵詞：淋巴系腫瘤，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

　　背景 急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)是血液系統(tǒng)惡性腫瘤中較為常見的疾病,其中T-ALL由于其易對(duì)髓外組織和器官的浸潤(rùn),緩解后極易復(fù)發(fā),治療還比較困難；而Burkitt's淋巴瘤是一種侵襲性B細(xì)胞NHL,疾病進(jìn)展快,常規(guī)化療的效果不佳。隨著現(xiàn)代治療方法的改進(jìn)以及支持治療的加強(qiáng),大劑量多藥聯(lián)合化療提高了高危淋巴系腫瘤的完全緩解率(CR),但遠(yuǎn)期療效并不令人滿意,復(fù)發(fā)是治療失敗的主要原因,一旦復(fù)發(fā),再次緩解率低,預(yù)后差。難治復(fù)發(fā)仍然是高危淋巴系腫瘤治療的主要障礙和亟待解決的難題,而耐藥是導(dǎo)致難治復(fù)發(fā)的重要因素。此外,大劑量多藥聯(lián)合化療的毒副作用導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥也是影響高危淋巴系腫瘤療效進(jìn)一步提高的主要障礙之一,不少患者死于化療的并發(fā)癥而不是腫瘤的進(jìn)展。由于化療導(dǎo)致的系統(tǒng)性毒性和藥物耐藥是高危淋巴系腫瘤治療失敗的主要障礙,而新的分子靶向藥物也存在價(jià)格昂貴等問題,從傳統(tǒng)價(jià)廉、且毒副作用小的藥物中開發(fā)具有抗腫瘤活性的“新用途”越來越引起重視。 Disulfiram (DSF)是臨床應(yīng)用超過60年的抗酗酒藥物,安全性好,價(jià)格低廉。研究發(fā)現(xiàn)DSF單藥可以誘導(dǎo)一系列實(shí)體瘤細(xì)胞的凋亡及抑制其增殖,但是關(guān)于其對(duì)白血病細(xì)胞的作用尚存爭(zhēng)議。作為二價(jià)金屬離子螯合劑,DSF能夠強(qiáng)烈螯合Cu離子形成DSF/Cu復(fù)合物,體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Cu可顯著提高DSF誘導(dǎo)實(shí)體瘤細(xì)胞凋亡的作用。以往研究發(fā)現(xiàn)DSF誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的主要機(jī)制是抑制NF-κB的表達(dá),但關(guān)于DSF/Cu誘導(dǎo)實(shí)體瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制尚不明確。是否還有其他機(jī)制參與DSF/Cu誘導(dǎo)實(shí)體瘤細(xì)胞凋亡仍需要進(jìn)一步探索。 藥物在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的同時(shí)也觸發(fā)了抗凋亡因子的產(chǎn)生,這是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞耐藥的重要機(jī)制。而NF-κB則是最主要的抗凋亡因子之一。NF-κB是包含p50和p65在內(nèi)的一種異二聚體。其中p65所占比例較多,且調(diào)控下游一系列抗凋亡基因的表達(dá),因此,p65被認(rèn)為是調(diào)控NF-κB活性的關(guān)鍵成分。抑制p65的活性可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡,并且可以減少NF-κB調(diào)控的抗凋亡因子的表達(dá)。而p65的過度表達(dá)可以誘導(dǎo)NF-κB持續(xù)活化引起細(xì)胞耐藥。 ROS的產(chǎn)生是細(xì)胞呼吸作用的結(jié)果,在許多細(xì)胞生物學(xué)特性中,ROS的產(chǎn)生與一些病理過程有關(guān)。ROS可以誘導(dǎo)包括蛋白、磷脂以及DNA在內(nèi)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。研究表明腫瘤細(xì)胞ROS水平略高于正常細(xì)胞,但由于有效的抗氧化機(jī)制的存在,腫瘤細(xì)胞對(duì)相對(duì)高水平的ROS是可以耐受。但當(dāng)各種因素導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的ROS水平超過其可耐受閾值則會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡,同時(shí)高水平的ROS可破壞具有抗氧化作用的轉(zhuǎn)錄因子Nrf2活性,因而進(jìn)一步增強(qiáng)ROS介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。此外,ROS與JNK通路在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡過程中可能存在相互促進(jìn)作用。 近幾十年來,Disulfiram (DSF)由于可以抑制醛脫氫酶而一直用于抗酗酒治療,副作用很小。而最近的研究則關(guān)注到DSF抗腫瘤的作用,已有不少的研究報(bào)道DSF聯(lián)合Cu可以誘導(dǎo)包括膠質(zhì)瘤、肺癌、黑色素瘤細(xì)胞在內(nèi)的許多實(shí)體瘤細(xì)胞的凋亡。而關(guān)于DSF/Cu對(duì)淋巴系腫瘤細(xì)胞作用的研究報(bào)道較少。本課題旨在探討DSF/Cu能否有效殺傷人淋巴系腫瘤Molt4和Raji細(xì)胞株以及與ROS、JNK、Nrf2以及NF-κB通路的關(guān)系以及各通路之間的相互聯(lián)系。 研究目的 本課題以人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Molt4以及B細(xì)胞淋巴瘤(Burkitt's)細(xì)胞株Raji為研究對(duì)象,探討DSF/Cu能否在體外誘導(dǎo)Molt4和Raji細(xì)胞的凋亡,并進(jìn)一步從ROS、JNK、Nrf2以及NF-κB通路探討其潛在的分子機(jī)制。 研究方法 1、細(xì)胞株：人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Molt4及人B細(xì)胞淋巴瘤(Burkitt's)細(xì)胞株Raji。 2、MTT法評(píng)價(jià)濃度分別為0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和上述濃度DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理24小時(shí)對(duì)上述不同腫瘤細(xì)胞的體外抑制增殖的作用和明確DSF和DSF/Cu對(duì)上述腫瘤細(xì)胞的IC50。 3、1) AnnexinⅤ/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和上述濃度DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Molt4細(xì)胞株24小時(shí)后凋亡細(xì)胞比例；2) AnnexinⅤ/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)0.5、1、2.5、5、7.5μm/ml的DSF和上述濃度DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Raji細(xì)胞24小時(shí)后凋亡細(xì)胞比例； 4、Hoechst33342染色法觀察不同濃度DSF和DSF/Cu處理兩種腫瘤細(xì)胞后的形態(tài)變化； 5、流式細(xì)胞儀檢測(cè)濃度分別為0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和上述濃度DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Molt4細(xì)胞株8小時(shí)候細(xì)胞內(nèi)ROS水平； 6、應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分別檢測(cè)濃度為0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和DSF聯(lián)合Cu離子(1gM)以及DSF/Cu/NAC處理Molt4細(xì)胞株24 小時(shí)后Nrf2基因的表達(dá),采用2-Δct法對(duì)PCR結(jié)果進(jìn)行計(jì)算,分析Nrf2的表 達(dá)量與各種不同處理組的關(guān)系。 7、Western Blotting檢測(cè)0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和上述濃度DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Molt4細(xì)胞株24小時(shí)以及Cu組(1μm)、DSF組(DSF:IC50-DSF/Cu)、DSF/Cu組(DSF:IC50-DSF/Cu, Cu:1μm); DSF/Cu/NAC組(DSF:IC50-DSF/Cu, Cu:1μm, NAC:10mM)五組作用24小時(shí)后Molt4細(xì)胞Bcl-2、JNK,磷酸化JNK(p-JNK)、Nrf2和p65蛋白表達(dá)變化。 8、采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩組間均數(shù)的比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)方法；配對(duì)劑量資料的比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；多組間均數(shù)比較使用單因素方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì),在方差分析顯著的情況下使用Bonferroni(方差齊性)進(jìn)行多重比較；若方差不齊則采用近似F檢驗(yàn)(如Welch方法)代替方差分析后采用Dunnett T3方法進(jìn)行多重比較；計(jì)量資料用x±s表示,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05,雙側(cè)檢驗(yàn)。 結(jié)果 1、DSF單藥及DSF/Cu對(duì)兩種細(xì)胞株在體外均有明顯抑制增殖作用。MTT結(jié)果顯示：DSF單藥對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞24小時(shí)的IC50值分別為：(IC50-Molt4-DSF=1.314±0.229μM/ml)、(IC50-Raji-DSF=5.064±2.268μM/ml); DSF/Cu對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞的IC50值分別為：(IC50-Molt4-DSF/Cu=0.435±0.109μM/ml), (IC50-Raji-DSF/Cu=0.891±0.093μM/ml)。DSF/Cu對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞的IC50顯著低于DSF單藥,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.993、P=0.004和t=0.610、P=0.033),提示Cu可顯著增強(qiáng)DSF對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞的增殖抑制作用。 2、DSF單藥及DSF/Cu對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡作用。[1] Hoechst33342染色觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變：顯微鏡觀察不同濃度DSF和DSF/Cu對(duì)Molt4和Raji細(xì)胞處理24小時(shí)后,通過Hoechst33342染色觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變,結(jié)果發(fā)現(xiàn),Molt4細(xì)胞株經(jīng)低濃度的DSF(0.125、0.25、0.5μM)處理后細(xì)胞凋亡特征不明顯,而當(dāng)DSF濃度提高為(1、2gM)時(shí),細(xì)胞出現(xiàn)核固縮、凝集,并有凋亡小體,變現(xiàn)為明亮的顆粒狀藍(lán)染；而DSF/Cu組在低濃度組(0.125μM)就可見較典型的凋亡現(xiàn)象,但當(dāng)濃度提高為0.25μM后,凋亡現(xiàn)象更加明顯,且隨DSF/Cu濃度增加而增多。Raji細(xì)胞經(jīng)DSF和DSF/Cu處理后同樣出現(xiàn)與Molt4細(xì)胞相似的形態(tài)學(xué)變化。 [2] AnnexinⅤ/PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡細(xì)胞比例：根據(jù)MTT和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選取0.125、0.250.512μm/ml的DSF和DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Molt4細(xì)胞株24小時(shí)后觀察細(xì)胞凋亡比例變化。結(jié)果顯示,DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4濃度主效應(yīng)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=423.317, P=0.000); DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4細(xì)胞處理方法主效應(yīng)差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=84.305,P=0.000)。提示隨著DSF或者DSF/Cu濃度增加,Molt4細(xì)胞的凋亡細(xì)胞比例逐漸升高,凋亡比例表現(xiàn)劑量依賴性。進(jìn)一步應(yīng)用方差分析比較兩種不同處理組細(xì)胞凋亡率的差異。對(duì)照組DSF、DSF/Cu的自然凋亡率分別為4.016%±0.930%、3.977%+0.609%。經(jīng)單因素方差分析,不同濃度的DSF或者DSF/Cu均可誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞凋亡,與對(duì)照組相比均有顯著性差異(F=98.573、P=0.000; F=199.891、P=0.000);應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),同一濃度的DSF和DSF/Cu作用于Molt4細(xì)胞,其凋亡細(xì)胞比例存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-8.338, P=0.001; t=-4.957, P=0.008; r=-24.034, P=0.001; t=-14.614, P=0.001;t=-14.52, P=0.000)。提示同一濃度的DSF/Cu比DSF更能有效誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞凋亡。 同樣,我們選取0.5、1、2.5、5、7.5μm/ml的DSF和DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Raji細(xì)胞24小時(shí)后觀察凋亡細(xì)胞比例；結(jié)果顯示,DSF和DSF/Cu分別作用于Raji細(xì)胞濃度主效應(yīng)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=356.370,P=0.000); DSF和DSF/Cu分別作用于Raji細(xì)胞處理方法主效應(yīng)差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=419.434,P=0.000)。提示隨著DSF或者DSF/Cu濃度增加,Raji細(xì)胞的凋亡細(xì)胞比例逐漸升高,凋亡比例表現(xiàn)劑量依賴性。應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)檢測(cè)同一濃度下,DSF和DSF/Cu處理Raji細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡比例是否存在差異。結(jié)果顯示DSF和DSF/Cu各濃度誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡比例相比,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-12.277, P=0.000; t=-10.748, P=0.000; t=-9.014, P=0.001; t=-8.334,P=0.001; t=-11.321, P=0.000)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果,我們認(rèn)為DSF和DSF/Cu對(duì)Raji細(xì)胞均存在誘導(dǎo)凋亡的能力,但DSF/Cu誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用明顯強(qiáng)于DSF。 [3] Western blotting檢測(cè)抗凋亡蛋白表達(dá)：我們選擇不同濃度的DSF (0.125、0.25、0.5、1、2μM/ml)和以上濃度DSF聯(lián)合Cu 1μM作用于Molt4細(xì)胞24小時(shí)后,以Western Blotting方法檢測(cè)抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表達(dá)情況。結(jié)果顯示：DSF/Cu組Molt4細(xì)胞內(nèi)Bcl-2蛋白表達(dá)較空白對(duì)照組受抑,且呈劑量依賴性。而DSF單藥組僅在很高濃度是才能下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)。 3. DSF/Cu可提高腫瘤細(xì)胞內(nèi)的ROS水平：我們選取0、0.125、0.25、0.5、1、2μm/ml的DSF和DSF聯(lián)合Cu離子(1μM)處理Molt4細(xì)胞8小時(shí)后觀察凋亡細(xì)胞內(nèi)ROS水平變化；結(jié)果顯示,DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4細(xì)胞濃度主效應(yīng)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=123.070,P=0.000);隨著DSF或者DSF/Cu濃度增加,Molt4細(xì)胞的ROS水平比例逐漸升高,DSF/Cu組升高更加明顯,ROS水平比例表現(xiàn)劑量依賴性。應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)檢測(cè)同一濃度下,DSF和DSF/Cu處理Molt4細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS蓄積是否存在差異。結(jié)果顯示DSF和DSF/Cu各濃度誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡比例相比,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-8.338, P=0.001; t=-4.957,P=0.008;t=-24.034, P=0.0001;t=-14.614, P=0.001;t=-14.529,P=0.000)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果,我們認(rèn)為DSF和DSF/Cu對(duì)Molt4細(xì)胞均存在誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS蓄積的能力,但DSF/Cu誘導(dǎo)誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS蓄積的能力的作用明顯強(qiáng)于DSF。 4、DSF/Cu可下調(diào)腫瘤細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)水平：將不同濃度的DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4細(xì)胞24小時(shí)后,以實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)水平。結(jié)果顯示,DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4濃度主效應(yīng)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=34.909,P=0.000)；DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4細(xì)胞處理方法主效應(yīng)差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=159.371,ρ=0.000)。隨著DSF/Cu濃度增加,Molt4細(xì)胞的Nrf2表達(dá)水平逐漸降低,呈劑量依賴性。進(jìn)一步分析比較兩種不同處理組細(xì)胞Nrf2表達(dá)水平的差異,應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)檢測(cè)同一濃度下,DSF和DSF/Cu處理Molt4細(xì)胞后Nrf2水平變化是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果顯示DSF和DSF/Cu各濃度誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)Nrf2水平變化相比較,均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=3.263, P=0.031; t=11.668, P=0.000; t=11.563, P=0.000; t=10.612, P=0.000;t=13.142, P=0.000)。結(jié)果表明DSF、DSF/Cu均可抑制細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá),而DSF/Cu組對(duì)Nrf2的抑制效果更加明顯。 5、DSF/Cu可上調(diào)JNK通路表達(dá),下調(diào)p65和Nrf2通路表達(dá)：將不同濃度的DSF和DSF/Cu分別作用于Molt4細(xì)胞24小時(shí)后,Western blotting結(jié)果顯示兩處理組總JNK蛋白表達(dá)均無明顯變化,DSF/Cu組磷酸化JNK (p-JNK)表達(dá)隨DSF/Cu濃度增加而明顯上調(diào),而DSF單藥組p-JNK表達(dá)沒有明顯變化。同樣以Western blotting方法檢測(cè)p65蛋白變化,結(jié)果顯示DSF單藥和DSF/Cu組隨藥物濃度增高,p65表達(dá)逐漸下調(diào),但DSF/Cu組p65表達(dá)下調(diào)程度顯著高于DSF單藥組。Western blotting方法檢測(cè)Nrf2蛋白表達(dá)顯示DSF組低濃度似乎可下調(diào)Nrf2表達(dá),但隨濃度增加這種作用反而不明顯,而DSF/Cu組隨藥物濃度增加,Nrf2表達(dá)逐漸下調(diào)。 6、ROS抑制劑—NAC對(duì)DSF/Cu誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞凋亡的影響：應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察各濃度DSF/Cu及加入ROS抑制劑NAC后作用Molt4細(xì)胞24小時(shí)后細(xì)胞凋亡比例的變化。加入NAC后DSF/Cu誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞的凋亡細(xì)胞比例均出現(xiàn)不同程度下降,應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)顯示同一濃度下DSF/Cu和DSF/Cu/NAC兩種處理后凋亡細(xì)胞比例均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-1.719, P=0.161; t=5.090,P=0.007;t=-4.941, P=0.008; t=4.814, P=0.009; t=4.870, P=0.008), DSF/Cu組凋亡細(xì)胞比例明顯高于DSF/Cu/NAC組。提示DSF/Cu誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞的凋亡細(xì)胞比例可以被NAC所抑制。 7、ROS是DSF/Cu調(diào)控JNK.p65以及Nrf2表達(dá)的關(guān)鍵：將不同濃度DSF/Cu以及DSF/Cu/NAC處理Molt4細(xì)胞24小時(shí)后,應(yīng)用熒光定量PCR的方法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)水平。結(jié)果示加入NAC后DSF/Cu誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞后Nrf2的表達(dá)水平均出現(xiàn)不同程度上升,應(yīng)用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)檢測(cè)同一濃度下,DSF/Cu與DSF/Cu/NAC兩種方法處理細(xì)胞24小時(shí)后觀察細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)水平差異。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示在低濃度組(0.125μM)兩種處理的Nrf2水平無差異,但從0.25μM起,DSF/Cu和DSF/Cu/NAC處理細(xì)胞后Nrf2的水平均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,DSF/Cu組的表達(dá)水平明顯低于DSF/Cu/NAC組t=-2.622, P=0.059; t=-3.473, P=0.026; t=-4.651, P=0.010; t=-5.245, P=0.006; t=-8.693, P=0.001)。提示NAC可抑制DSF/Cu對(duì)Nrf2的表達(dá)水平的下調(diào)能力。選擇Cu (1μM)、DSF (0.5μM)、DSF/Cu(DSF:0.5μM, Cu:1μM)以及DSF/Cu/NAC (DSF:0.5μM, Cu:1μM, NAC:10mM)作用于Molt4細(xì)胞24小時(shí)后,應(yīng)用Western Blotting的方法,觀察細(xì)胞內(nèi)通路的變化。結(jié)果提示：Cu組、DSF組與空白對(duì)照組相比,p-JNK蛋白表達(dá)無明顯變化,DSF/Cu組p-JNK蛋白表達(dá)明顯增高,但可以被NAC所抑制。Cu組同空白對(duì)照組的p65表達(dá)無明顯變化,DSF組同DSF/Cu組的p65表達(dá)均較空白對(duì)照組明顯下調(diào),而DSF/Cu組p65表達(dá)下調(diào)更明顯,DSF/Cu對(duì)p65表達(dá)下調(diào)作用也可以被NAC抑制。同樣DSF/Cu組對(duì)Nrf2蛋白表達(dá)的下調(diào)作用也可被NAC所抑制。上述結(jié)果提示DSF/Cu很可能通過ROS調(diào)控著JNK、p65和Nrf2的表達(dá)。 結(jié)論 1、DSF單藥對(duì)淋巴系腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用；但Cu可顯著提高其抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用。 2、DSF單藥及DSF/Cu均可顯著提高M(jìn)olt4細(xì)胞內(nèi)ROS的水平,但DSF/Cu作用更加顯著。 3、DSF/Cu能夠增加Molt4細(xì)胞內(nèi)磷酸化JNK (p-JNK)的表達(dá)水平,下調(diào)p65和Nrf2的表達(dá),且呈劑量依賴性。DSF單藥下調(diào)p65的水平顯著低于DSF/Cu,且對(duì)p-JNK的表達(dá)無明顯影響。 4、ROS抑制劑NAC能明顯抑制DSF/Cu誘導(dǎo)Molt4細(xì)胞凋亡的能力,并能抑制DSF/Cu對(duì)p-JNK、p65和Nrf2蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié),提示ROS很可能是調(diào)控JNK、p65和Nrf2通路的關(guān)鍵。

  本文關(guān)鍵詞：淋巴系腫瘤，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。