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PHI對(duì)淋巴母細(xì)胞性白血病Molt
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本站編輯:admin 日期: 2010-08-12 18:52 點(diǎn)擊:次
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【中文摘要】【目的】研究PHI在體外對(duì)正常人單個(gè)核細(xì)胞和淋巴母細(xì)胞性白血病Molt-4細(xì)胞株的作用,觀察PHI對(duì)白血病細(xì)胞表觀遺傳學(xué)的影響,并初步探討其可能的機(jī)制!痉椒ā颗_(tái)盼藍(lán)拒染直接計(jì)數(shù)法、原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)法(TUNNEL法)觀察PHI對(duì)正常人單個(gè)核細(xì)胞增殖及凋亡的影響,采用MTT法、克隆抑制試驗(yàn)觀察PHI對(duì)Molt-4細(xì)胞增殖的影響;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察PHI誘導(dǎo)Molt-4細(xì)胞凋亡和對(duì)細(xì)胞周期的影響;用蛋白免疫印跡法(Western Blotting)觀察在PHI作用下Molt-4細(xì)胞的凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、凋亡底物PRAP表達(dá)的變化;用蛋白免疫印跡法(Western Blotting)檢測(cè)PHI對(duì)Molt-4細(xì)胞的組蛋白H3、H4乙酰化狀態(tài)和H3K4、H3K9甲基化狀態(tài)變化!窘Y(jié)果】PHI對(duì)正常人單個(gè)核細(xì)胞抑制作用不明顯,未見(jiàn)細(xì)胞凋亡。PHI抑制Molt-4細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)Molt-4細(xì)胞凋亡,阻滯Molt-4細(xì)胞的細(xì)胞周期于G0/G1期,呈時(shí)效和量效變化;隨著PHI作用時(shí)間和濃度的增加,線粒體膜蛋白Bcl-2, caspse-9及下游caspse-3,凋亡底物PRAP表達(dá)下降,而Caspase-8未見(jiàn)明顯變化;PHI能明顯抑制組蛋白去乙;(HADC)的活性,且組蛋白乙酰化酶P300表達(dá)增加,能顯著提高組蛋白H3、H4乙酰化水平,組蛋白H3K4甲基化增加而H3K9甲基化水平明顯下降。【結(jié)論】PHI對(duì)正常人的單個(gè)核細(xì)胞的作用較小,卻能抑制Molt-4細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡,阻滯Molt-4細(xì)胞的細(xì)胞周期于G0/G1期。提示PHI是一種安全的白血病化療藥物。線粒體凋亡途徑抗凋亡蛋白Bcl-2的裂解、凋亡蛋白Caspase-9的活化,而細(xì)胞死亡受體途徑的Caspase-8未見(jiàn)變化,線粒體凋亡途徑可能是其作用的主要機(jī)制,凋亡的受體-配體途徑作用較小。PHI能抑制HADC
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