蘋果酸是草莓果實主要的有機酸之一,其含量的高低顯著影響草莓果實的風味。該研究以‘紅顏’草莓為試材,采用反轉錄(RT-PCR)的方法克隆得到一個新的MYB轉錄因子——FaMYB73。該基因包含有756 bp的開放閱讀框,編碼252個氨基酸,預測其蛋白質分子量為27.6 kD,等電點為6.8。功能域分析表明,FaMYB73蛋白含有保守的R2R3結構域;亞細胞定位于細胞核中。實時熒光定量(qRT-PCR)分析表明,FaMYB73基因在草莓各個組織均有表達,且在花和葉中的表達相對較高;在果實的白果期FaMYB73基因的表達量最高,且隨著果實成熟,FaMYB73基因的表達下調,說明該基因的表達具有組織和時期特異性。高效液相色譜法(HPLC)檢測結果發(fā)現(xiàn),蘋果酸含量在草莓果實發(fā)育期呈先上升后下降的趨勢,且與FaMYB73基因的表達量呈正相關。草莓瞬時注射結果顯示,FaMYB73過表達顯著促進了蘋果酸的積累,沉默則顯著降低了蘋果酸的含量。同時,獲得了2個轉FaMYB73基因煙草穩(wěn)定表達株系,FaMYB73過量表達顯著提高了煙草葉片中蘋果酸的含量。研究表明,FaMYB73參與調控草莓果實中蘋果酸的合成...

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圖1 草莓果實FaMYB73基因的cDNA全長序列

為探究FaMYB73在果實發(fā)育期間的功能,通過qRT-PCR檢測了草莓根、莖、葉、花、果實,以及大綠、白果、轉色和成熟4個發(fā)育期果實中FaMYB73的相對表達量(圖6)。結果表明:FaMYB73在各個組織中均具有表達,其中葉片和花中表達量較高(圖6,A)。隨著果實的發(fā)育,FaMY....

圖2 FaMYB73編碼區(qū)全長(ORF)的RT-PCR擴增

圖1草莓果實FaMYB73基因的cDNA全長序列圖3草莓果實FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進化分析

圖3 草莓果實FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進化分析

圖2FaMYB73編碼區(qū)全長(ORF)的RT-PCR擴增圖4FaMYB73亞細胞定位(標尺=20μm)

圖4 FaMYB73亞細胞定位(標尺=20 μm)

圖3草莓果實FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進化分析圖5FaMYB73蛋白的結構域

本文編號：4037213