蘋(píng)果酸是草莓果實(shí)主要的有機(jī)酸之一,其含量的高低顯著影響草莓果實(shí)的風(fēng)味。該研究以‘紅顏’草莓為試材,采用反轉(zhuǎn)錄(RT-PCR)的方法克隆得到一個(gè)新的MYB轉(zhuǎn)錄因子——FaMYB73。該基因包含有756 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼252個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)分子量為27.6 kD,等電點(diǎn)為6.8。功能域分析表明,FaMYB73蛋白含有保守的R2R3結(jié)構(gòu)域;亞細(xì)胞定位于細(xì)胞核中。實(shí)時(shí)熒光定量(qRT-PCR)分析表明,FaMYB73基因在草莓各個(gè)組織均有表達(dá),且在花和葉中的表達(dá)相對(duì)較高;在果實(shí)的白果期FaMYB73基因的表達(dá)量最高,且隨著果實(shí)成熟,FaMYB73基因的表達(dá)下調(diào),說(shuō)明該基因的表達(dá)具有組織和時(shí)期特異性。高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),蘋(píng)果酸含量在草莓果實(shí)發(fā)育期呈先上升后下降的趨勢(shì),且與FaMYB73基因的表達(dá)量呈正相關(guān)。草莓瞬時(shí)注射結(jié)果顯示,FaMYB73過(guò)表達(dá)顯著促進(jìn)了蘋(píng)果酸的積累,沉默則顯著降低了蘋(píng)果酸的含量。同時(shí),獲得了2個(gè)轉(zhuǎn)FaMYB73基因煙草穩(wěn)定表達(dá)株系,FaMYB73過(guò)量表達(dá)顯著提高了煙草葉片中蘋(píng)果酸的含量。研究表明,FaMYB73參與調(diào)控草莓果實(shí)中蘋(píng)果酸的合成...

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圖1 草莓果實(shí)FaMYB73基因的cDNA全長(zhǎng)序列

為探究FaMYB73在果實(shí)發(fā)育期間的功能,通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)了草莓根、莖、葉、花、果實(shí),以及大綠、白果、轉(zhuǎn)色和成熟4個(gè)發(fā)育期果實(shí)中FaMYB73的相對(duì)表達(dá)量(圖6)。結(jié)果表明:FaMYB73在各個(gè)組織中均具有表達(dá),其中葉片和花中表達(dá)量較高(圖6,A)。隨著果實(shí)的發(fā)育,FaMY....

圖2 FaMYB73編碼區(qū)全長(zhǎng)(ORF)的RT-PCR擴(kuò)增

圖1草莓果實(shí)FaMYB73基因的cDNA全長(zhǎng)序列圖3草莓果實(shí)FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化分析

圖3 草莓果實(shí)FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化分析

圖2FaMYB73編碼區(qū)全長(zhǎng)(ORF)的RT-PCR擴(kuò)增圖4FaMYB73亞細(xì)胞定位(標(biāo)尺=20μm)

圖4 FaMYB73亞細(xì)胞定位(標(biāo)尺=20 μm)

圖3草莓果實(shí)FaMYB73與擬南芥MYB(At)家族蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化分析圖5FaMYB73蛋白的結(jié)構(gòu)域

本文編號(hào)：4037213