以鬧羊花的葉片為試材,采用正交實驗和單因素試驗2種方法對鬧羊花ISSR-PCR反應(yīng)體系的主要影響因子(Taq DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、引物、Mg²⁺以及反應(yīng)程序)進行了優(yōu)化組合。以期為深入開展鬧羊花種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究提供參考依據(jù)。結(jié)果表明:鬧羊花ISSR-PCR反應(yīng)體系中各組分的Taq DNA聚合酶用量為2.5 U,引物濃度為0.2μmol·L^-1,Mg²⁺濃度為1.0 mmol·L^-1,dNTPs濃度為0.4 mmol·L^-1,模板DNA濃度為60 ng,10×Buffer為2μL,以純水補足反應(yīng)總體積至20μL。擴增程序為94℃條件下預(yù)變性5 min;94℃條件下變性30 s,49.6℃條件下退火30 s,72℃條件下延伸30 s,以上3個步驟循環(huán)45次,最后72℃延伸5 min。 

【文章來源】：北方園藝. 2020,(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

鬧羊花葉片DNA電泳圖

ISSR-PCR正交實驗

不同引物濃度對于ISSR-PCR擴增結(jié)果的影響

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3550097