以福建省廈門市廈門植物園中采集的一株野生真菌為研究對象,觀測其子實(shí)體的形態(tài)特征以及菌絲的生長情況,并對其進(jìn)行了分子鑒定。在GenBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行Blast比對ITS序列后,采用NJ(Neighbor-Joining)鄰接法構(gòu)建出系統(tǒng)發(fā)育樹,鑒定出該野生真菌為古巴栓孔菌(Tramtes cubensis),屬于真菌門(Eumycota),擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina),層菌綱(Hymenomycetes)非褶菌目(Aphyllophorales),多孔菌科(Polyporaceae),栓菌屬(Trametes)。

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圖1野生真菌TNCY002子實(shí)體的形態(tài)

菌絲形態(tài)見圖2，菌絲都以接種塊為中心，向外生長成圓形絨毛狀，菌絲呈白色同心環(huán)狀，環(huán)間凹陷，菌絲邊緣較整齊。在平板內(nèi)不分泌色素。平板菌絲培養(yǎng)8d后即可長滿。斜面菌絲培養(yǎng)8d后會沿著玻璃壁長出氣生菌絲。圖2供試菌株的固體培養(yǎng)基上的菌落的形態(tài)

圖2供試菌株的固體培養(yǎng)基上的菌落的形態(tài)

圖1野生真菌TNCY002子實(shí)體的形態(tài)2.2菌絲DNA提取及凝膠電泳檢測

圖3TNCY002DNA電泳結(jié)果

對菌絲體進(jìn)行DNA提取，電泳條帶清晰、較明亮，無明顯后拖尾現(xiàn)象（圖3），提取的基因組DNA可用于后續(xù)試驗(yàn)。2.3ITS-PCR擴(kuò)增及序列比對

圖4ITS-PCR電泳結(jié)果

以提取的DNA為模板，ITS1、ITS4為引物進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后出現(xiàn)了清晰明亮的單一帶，結(jié)果顯示片段大小約為500～700bp之間（圖4）。2.4TNCY002的系統(tǒng)進(jìn)化分析

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