通過農(nóng)桿菌介導的子葉節(jié)轉化法獲得的大豆T-DNA插入突變體ls-1是一個滯綠突變體,該突變體同時表現(xiàn)出花器官異常和種子敗育的表型.通過染色體步移的方法分析發(fā)現(xiàn)T-DNA插到大豆基因組的7號染色體上,對測序獲得的插入位點序列進行了PCR驗證.進一步通過半定量RT-PCR和生物信息學分析,推測突變體表型的產(chǎn)生可能由于T-DNA插入編碼S1型核酸內切酶的基因Glyma.07G191100和編碼線粒體中交替型NAD(P)H脫氫酶的基因Glyma.07G191200之間,使二者表達受到影響造成的.該研究為后續(xù)的基因功能研究奠定了基礎.

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【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 突變體的篩選及基因組PCR
    1.3 染色體步移
    1.4 生物信息學分析
    1.5 RNA提取和半定量RT-PCR
2 實驗結果
    2.1 突變體ls-1的獲得
    2.2 染色體步移確定T-DNA插入位置及其PCR驗證
    2.3 可能受T-DNA插入影響的候選基因驗證
    2.4 候選基因編碼產(chǎn)物分析
3 討論



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