發(fā)布時(shí)間：2023-04-02 11:48

　　大豆除了含有大量的脂類和蛋白質(zhì)外,還含有糖類和酚類物質(zhì),為解決難于從大豆中提取高質(zhì)量DNA和傳統(tǒng)提取方法耗時(shí)長的問題,本研究以中豆41與天隆一號(hào)的幼嫩葉片(V3)和成熟種子作為材料,對(duì)高鹽低pH法進(jìn)行改良,提高其裂解液pH值,同時(shí)結(jié)合冷凍裂解法縮短裂解時(shí)間,使用不同pH值醋酸鈉純化DNA,并與經(jīng)典CTAB法進(jìn)行比較,評(píng)價(jià)其提取DNA的效果及其應(yīng)用范圍。結(jié)果表明,高鹽高pH法對(duì)成熟種子的DNA提取效率較高,且蛋白與RNA污染少。CTAB法提取的DNA雖然完整性較高,但是耗時(shí)較長,蛋白與RNA污染較多。另外,高鹽高pH法提取的DNA PCR擴(kuò)增條帶清晰,與常規(guī)CTAB法提取DNA擴(kuò)增效果一致,但其DNA質(zhì)量不能滿足高通量測(cè)序要求。綜上,改良的高鹽高pH法是一種快速有效的大豆DNA提取方法,可滿足常規(guī)分子試驗(yàn)的要求。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    1.4 方法
        1.4.1 高鹽高pH法
        1.4.2 CTAB法
        1.4.3 DNA質(zhì)量檢測(cè)
        1.4.4 PCR擴(kuò)增檢測(cè)
        1.4.5 建庫合格性檢測(cè)
    1.5 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 不同方法提取DNA得率分析
    2.2 不同方法提取DNA質(zhì)量分析
    2.3 PCR擴(kuò)增結(jié)果
    2.4 建庫合格性檢測(cè)結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論



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