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利用SSR標(biāo)記鑒定當(dāng)歸的真實(shí)性

發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 09:53
  采集當(dāng)歸及近緣屬種材料,從文獻(xiàn)中搜集SSR引物,及從NCBI中下載當(dāng)歸EST序列并設(shè)計(jì)若干引物,采用SSR標(biāo)記技術(shù)篩選可用于鑒定當(dāng)歸真實(shí)性的特異標(biāo)記。結(jié)果表明,共合成引物75對(duì),利用2個(gè)當(dāng)歸模板進(jìn)行引物篩選,能夠擴(kuò)增出清晰條帶的引物有21對(duì),有效引物擴(kuò)增率為28%,篩選出多態(tài)性引物5對(duì),多態(tài)引物擴(kuò)增率為6.7%。5對(duì)引物在36份當(dāng)歸及近緣屬種間共檢測(cè)到41個(gè)位點(diǎn),平均為8.2個(gè);多態(tài)性位點(diǎn)41個(gè),多態(tài)性比率(PPB)為100%;多態(tài)信息含量為0.118 7~0.310 1,平均為0.258 8。遺傳距離和相似度分析表明,當(dāng)歸與獨(dú)活的遺傳距離最近,與紅柴胡遺傳距離最遠(yuǎn)。當(dāng)歸與近緣屬種間的遺傳距離最小值明顯大于4個(gè)產(chǎn)地的當(dāng)歸種內(nèi)遺傳距離最大值,因此,SSR標(biāo)記可有效地鑒定區(qū)分當(dāng)歸與其它近緣屬藥材。 

【文章來源】:甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020,(07)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

利用SSR標(biāo)記鑒定當(dāng)歸的真實(shí)性


引物CH50對(duì)36份供試材料的聚丙烯酰氨凝膠電泳圖譜

指紋圖譜,聚類分析,材料,當(dāng)歸


中藥材傳統(tǒng)的鑒定方法主要是性狀鑒定、顯微鑒定和化學(xué)特征鑒定[15],受原植物生長環(huán)境、生長期及炮制加工工藝的影響較大。DNA分子鑒定法在作物上應(yīng)用多年,近年來在藥用植物上得到迅速發(fā)展。陳士林[14]對(duì)上千種中草藥及混偽品的DNA條形碼經(jīng)過10 a研究,創(chuàng)建了“以ITS2為主體的中草藥DNA條形碼鑒定新體系”。本研究發(fā)現(xiàn),利用SSR標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建的當(dāng)歸指紋圖譜表明,來自4個(gè)產(chǎn)區(qū)的29份當(dāng)歸(包括5個(gè)當(dāng)歸品種1個(gè)品系)指紋圖譜完全一致。從聚類結(jié)果看,4個(gè)產(chǎn)地的當(dāng)歸居群之間遺傳距離僅為0.013 4~0.091 7,表明甘肅栽培當(dāng)歸種質(zhì)資源相似度極高。甘肅是當(dāng)歸規(guī)模化種植的最大省份,其育苗及栽培管理技術(shù)相對(duì)其他藥材成熟,幾大主產(chǎn)區(qū)的當(dāng)歸種源來源一致性高,這可能是SSR標(biāo)記未檢測(cè)到產(chǎn)地差異的主要原因。道地藥材岷歸其品質(zhì)高于其他產(chǎn)區(qū)的當(dāng)歸,主要是由產(chǎn)區(qū)氣候環(huán)境和土壤多因素影響,如若進(jìn)行產(chǎn)地鑒定從而構(gòu)建道地藥材的獨(dú)有標(biāo)記從生境、化學(xué)成分結(jié)合分子標(biāo)記更加可行。近年來甘肅省定西市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院選育出了岷歸系列品種,其中岷歸1號(hào)、岷歸5號(hào)、岷歸6號(hào)、PGIJ2009-0082為系統(tǒng)選育的當(dāng)歸品種(系),岷歸3號(hào)和岷歸4號(hào)為重離子輻照生物育種選育的當(dāng)歸品種。目前甘肅大面積種植的當(dāng)歸品種為岷歸1號(hào),采用人工選擇的傳統(tǒng)育種方法,在人工選育優(yōu)良品種的過程中只有每一世代里最符合需求的植株的種子才能被繼續(xù)播種,這樣的篩選導(dǎo)致了遺傳瓶頸,減少了整個(gè)基因組中的遺傳多樣性[16-17]。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]一年生當(dāng)歸直播種植技術(shù)規(guī)程[J]. 米永偉,龔成文,謝志軍,武偉國.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2018(12)
[2]起壟覆膜方式對(duì)岷縣當(dāng)歸生產(chǎn)發(fā)育及產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[J]. 趙榮,王富勝,宋振華.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2018(10)
[3]赤霉素浸根對(duì)溫室當(dāng)歸苗出苗及生長進(jìn)程的影響[J]. 張立軍,蔡子平,張廷紅,米永偉,王國祥.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2018(08)
[4]當(dāng)歸栽培新技術(shù)研究綜述[J]. 劉學(xué)周,康天蘭.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2016(11)
[5]基于ITS條形碼標(biāo)記對(duì)當(dāng)歸屬藥用植物的鑒別[J]. 閻夢(mèng)穎,房敏峰,祝娟,楊一欣,王若楠,董婉琳,李忠虎.  中草藥. 2016(06)
[6]基于ISSR的甘肅不同產(chǎn)區(qū)栽培當(dāng)歸遺傳多樣性研究[J]. 朱田田,晉玲,張裴斯,李應(yīng)東,杜弢,何子清.  中草藥. 2015(23)
[7]基于內(nèi)部簡單重復(fù)系列(ISSR)分析的當(dāng)歸分子鑒定[J]. 張春,朱燁,何穎,莊元春.  中國藥學(xué)雜志. 2014(10)
[8]當(dāng)歸藥材及其混偽品ITS2條形碼鑒定[J]. 辛天怡,姚輝,韓建萍,宋經(jīng)元.  科研信息化技術(shù)與應(yīng)用. 2013(03)
[9]多基原藥材秦艽ITS2條形碼鑒定研究[J]. 羅焜,馬培,姚輝,辛天怡,胡燕,鄭司浩,黃林芳,劉軍,宋經(jīng)元.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2012(12)
[10]當(dāng)歸新品種岷歸4號(hào)選育及優(yōu)化種植技術(shù)研究[J]. 李鵬程,劉效瑞.  中藥材. 2011(07)

碩士論文
[1]當(dāng)歸及其混偽品的分子鑒定研究[D]. 羅沛宜.西南醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]甘肅省當(dāng)歸資源的RAPD分析[D]. 盛麗.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào):3401392

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