【目的】克隆紅麻谷胱甘肽還原酶基因（HcGR）并分析其組織表達特性及不同鹽脅迫下的表達模式,為深入研究HcGR基因在響應鹽脅迫的分子調(diào)控機制提供理論參考�！痉椒ā炕诩t麻轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果,克隆HcGR基因,對其序列進行生物信息學分析,并利用實時熒光定量PCR檢測HcGR基因在紅麻不同組織及不同鹽度脅迫[CK（0mmol/L NaCl）、T1（50 mmol/L NaCl）、T2（100 mmol/L NaCl）和T3（200 mmol/L NaCl）]下的表達情況�！窘Y(jié)果】克隆獲得的HcGR基因開放閱讀（ORF）長度為1698 bp,其編碼蛋白相對分子量為60 kD,由555個氨基酸殘基組成,理論等電點（pI）為8.46,為親水性蛋白,定位于葉綠體;HcGR蛋白二級結(jié)構(gòu)以無規(guī)則卷曲為主,以α-螺旋、延伸鏈和β-轉(zhuǎn)角為輔,所占比例分別為44.14%、27.75%、22.16%和5.95%,其三級結(jié)構(gòu)由無規(guī)則卷曲、α-螺旋和延伸鏈3種結(jié)構(gòu)元件相互盤繞而成;該蛋白與榴蓮GR蛋白親緣關系較近。HcGR基因在紅麻根、莖和葉中均有表達,且相對表達量存在顯著差異（P<0.05,下同）,相對表達量... 

【文章來源】：南方農(nóng)業(yè)學報. 2020,51(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

紅麻總RNA(A）及Hc GR基因擴增產(chǎn)物（B）電泳檢測結(jié)果

Hc GR基因PCR擴增產(chǎn)物電泳檢測結(jié)果

生物和非生物脅迫均會嚴重影響植物的正常生長發(fā)育，導致植物細胞內(nèi)ROS含量大幅增加（Ramel et al.,2009；岳遠征等，2018）。植物體內(nèi)抗氧化劑含量是影響其抗逆性的重要因素之一，其中，GSH是廣泛存在于生物體內(nèi)的一種重要抗氧化劑，能與許多化合物發(fā)生反應，參與細胞內(nèi)的諸多生理代謝過程，從而對細胞內(nèi)硫醇的氧化還原狀態(tài)維持發(fā)揮重要作用（朱帆等，2015）。在植物的生長發(fā)育和抗逆境脅迫過程中，GR對GSH的再生起關鍵作用（郭麗紅等，2006）。目前，已有部分植物的GR基因被克隆鑒定，并進行轉(zhuǎn)基因功能驗證。Chang(1997）將大腸桿菌GR基因?qū)腚s種楊，從而獲得具有抗ROS特性的轉(zhuǎn)化體；Rebecca等（2000）將菜豆GR基因?qū)霟煵�，結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因煙草GR活性較非轉(zhuǎn)基因植株提高3～7倍；佘瑋（2010）研究表明，轉(zhuǎn)GR基因的苧麻中GR基因過量表達能明顯提高植株對氧化脅迫或其他逆境的耐受性。圖4 Hc GR蛋白三級結(jié)構(gòu)預測結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豆梨中谷胱甘肽還原酶基因的分離、表達特點及酶活性分析[J]. 李慧,闞家亮,王影,藺經(jīng),楊青松,常有宏.  果樹學報. 2019(01)
[2]植物對鹽脅迫的響應及耐鹽調(diào)控的研究進展[J]. 王康君,樊繼偉,陳鳳,李強,孫中偉,郭明明,張廣旭,鄭國良.  江西農(nóng)業(yè)學報. 2018(12)
[3]GA3與CPPU對葡萄果銹相關物質(zhì)合成及基因表達的影響[J]. 馮嬌,侯旭東,董禮花,陶建敏.  江蘇農(nóng)業(yè)學報. 2018(03)
[4]鹽脅迫對海州常山幼苗生長及生理特性的影響[J]. 岳遠征,李婭,羅雪琪,楊秀蓮,施婷婷,王良桂.  河南農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(01)
[5]逆境脅迫對油菜谷胱甘肽還原酶基因表達及其酶活性的影響[J]. 張騰國,聶亭亭,孫萬倉,史中飛,王娟.  應用生態(tài)學報. 2018(01)
[6]檸條錦雞兒抗壞血酸過氧化物酶基因（CkAPX）和谷胱甘肽還原酶基因（CkGR） cDNA片段的克隆及表達分析[J]. 康太,武宏豆,逯佰艷,龍曉剛,龔春梅,白娟.  西北林學院學報. 2016(03)
[7]苧麻谷胱甘肽還原酶基因（BnGR1）的克隆和表達分析[J]. 朱守晶,余偉林,石朝燕,揭雨成.  農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2015(10)
[8]哈氏弧菌谷胱甘肽還原酶基因克隆及原核表達[J]. 朱帆,丁燏,魯義善,簡紀常,吳灶和.  生物技術通報. 2015(06)
[9]橡膠樹胞質(zhì)型谷胱甘肽還原酶基因的克隆與表達分析[J]. 鄧治,劉輝,王岳坤,李德軍.  植物生理學報. 2014(11)
[10]茶樹谷胱甘肽還原酶基因CsGRs的克隆與表達分析[J]. 岳川,曹紅利,周艷華,王璐,郝心愿,王新超,楊亞軍.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2014(16)

博士論文
[1]苧麻對重金屬吸收和積累特征及鎘脅迫響應基因表達研究[D]. 佘瑋.湖南農(nóng)業(yè)大學 2010

碩士論文
[1]鎘脅迫下兩個紅麻品種形態(tài)、生理響應及差異基因發(fā)掘[D]. 賈瑞星.廣西大學 2019
[2]巨尾桉谷胱甘肽還原酶的克隆及其在低溫脅迫下的表達模式分析[D]. 韓瑤.華僑大學 2017
[3]南極衣藻谷胱甘肽還原酶基因的克隆、表達與定量分析[D]. 劉瑩.廣東海洋大學 2010



本文編號：3330939