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苧麻重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)P型ATP酶基因HMA1的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-12-11 03:34
  植物重金屬ATP酶(heavy metal transporting ATPase,HMA)涉及植物對(duì)重金屬的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)、解毒和富集等方面。為探究重金屬ATP酶HMA在苧麻耐鎘機(jī)制中的作用機(jī)制,本研究采用同源克隆法獲得了苧麻Bn HMA1,并對(duì)其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析及表達(dá)分析;構(gòu)建了苧麻酵母cDNA文庫(kù),成功構(gòu)建了p GBKT7-Bn HMA1融合載體和p426GPD-Bn HMA1酵母表達(dá)載體,分析了轉(zhuǎn)Bn HMA1酵母耐Cd表型,為后續(xù)研究鎘脅迫下Bn HMA1的分子機(jī)理奠定了基礎(chǔ),主要研究結(jié)果如下:(1)根據(jù)苧麻轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果中HMA基因的保守序列設(shè)計(jì)特異性引物,采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技術(shù)從苧麻中獲得了HMA全長(zhǎng)cDNA序列(Genbank:MK733841.1)。該基因cDNA全長(zhǎng)為2 811 bp,含有一個(gè)2 487 bp的開放閱讀框,編碼蛋白含828個(gè)氨基酸殘基,分子量為90.70 k Da,等電點(diǎn)(p I)為8.84,屬于P-type ATPase家族成員。與川桑(Morus notabilis)、白梨(Pyrus ...

【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1土壤中Cd的修復(fù)措施(引自文獻(xiàn)8)

圖1-1土壤中Cd的修復(fù)措施(引自文獻(xiàn)8)

第1章緒論3圖1-1土壤中Cd的修復(fù)措施(引自文獻(xiàn)8)Fig.1-1RemediationtechnologiesusedforsoilcontaminatedwithCd1.2植物耐鎘分子機(jī)制研究進(jìn)展通過(guò)不斷進(jìn)化與自然選擇,植物發(fā)展出了抵御重金屬毒害的防御機(jī)制,一方面通過(guò)調(diào)控根....


圖1-3構(gòu)建Mate&Plate酵母文庫(kù)原理

圖1-3構(gòu)建Mate&Plate酵母文庫(kù)原理

第1章緒論7個(gè)目的向量,許多研究者使用Gateway技術(shù)、-Fusion技術(shù)等[48]。而且,在最近的研究中,兩個(gè)cDNA文庫(kù)分別用作誘餌文庫(kù)和獵物文庫(kù),隨后進(jìn)行交配和篩選,從而可以在一個(gè)庫(kù)中篩選多個(gè)文庫(kù)[49]。構(gòu)造方法的不斷改進(jìn)使文庫(kù)中包含的信息更加全面和完整。Clontec....


圖2-1PCR擴(kuò)增電泳圖

圖2-1PCR擴(kuò)增電泳圖

第2章苧麻重金屬ATP酶BnHMA1的克隆與序列分析17圖2-1PCR擴(kuò)增電泳圖Fig.2-1PCRamplificationelectrophoresisDNAmarker上樣量為5μl,樣品上樣量為10μl;A:3"RACE的PCR擴(kuò)增電泳圖;B:5"RACE的PCR擴(kuò)增電泳....


圖2-2BnHMA1蛋白理化性質(zhì)預(yù)測(cè)分析

圖2-2BnHMA1蛋白理化性質(zhì)預(yù)測(cè)分析

湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文



本文編號(hào):4016121

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