目的:1、探討鄰苯二甲酸與立枯絲核菌菌絲生長的相互作用;2、鄰苯二甲酸與立枯絲核菌共培養(yǎng)體系對水培丹參的致害作用及其作用機理。通過以上兩個方面的研究證明鄰苯二甲酸介導立枯絲核菌的生長,進而影響重茬丹參的生長代謝,導致其連作障礙發(fā)生。通過本研究可闡明鄰苯二甲酸介導下土壤微環(huán)境的變化規(guī)律及相互作用機制,研究結(jié)果對消減丹參連作障礙,提升藥材產(chǎn)量和品質(zhì)方面具有重要理論指導意義,同時也為其他根類藥材連作障礙的消減提供重要借鑒。方法:1、通過氣相色譜法(Gas Chromatography,GC)確定丹參植株體內(nèi)所含鄰苯二甲酸酯類化合物;通過室內(nèi)菌絲生長抑制實驗,研究鄰苯二甲酸對立枯絲核菌菌絲生長的作用及臨界濃度;采用高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)測定菌絲生長抑制實驗中培養(yǎng)體系在菌絲生長前后鄰苯二甲酸含量的變化。2、加入外源性的鄰苯二甲酸介導立枯絲核菌生長后的共培養(yǎng)體系,測定水培丹參地上部與地下部的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量,研究鄰苯二甲酸與立枯絲核菌共培養(yǎng)體系對丹參抗氧化系統(tǒng)的...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 文獻綜述
    1 丹參概述
    2 連作障礙形成的原因及影響
        2.1 土壤環(huán)境及理化性質(zhì)的改變
            2.1.1 對植物的影響
            2.1.2 消減措施
        2.2 土壤微生物種群的改變
            2.2.1 對植物的影響
            2.2.2 消減措施
        2.3 酚酸類自毒物質(zhì)對植物的影響
            2.3.1 影響種子萌發(fā)
            2.3.2 影響植物的生長
            2.3.3 影響藥材質(zhì)量
        2.4 酚酸類自毒物質(zhì)對根際微生物的影響
            2.4.1 對細菌的影響
            2.4.2 對真菌的影響
    3 立枯絲核菌對連作障礙的影響
第二章 鄰苯二甲酸來源及其對立枯絲核菌菌絲生長影響研究
    1 材料與儀器
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器
    2 方法
        2.1 丹參植株內(nèi)鄰苯二甲酸酯類化合物提取與分離
            2.1.1 樣品溶液的制備
            2.1.2 標準品溶液的制備
            2.1.3 GC分析條件
        2.2 鄰苯二甲酸濃度實驗
        2.3 立枯絲核菌代謝物提取與分析
            2.3.1 立枯絲核菌代謝物提取
            2.3.2 HPLC檢測條件
            2.3.3 對照品溶液的制備
            2.3.4 標準曲線的繪制
            2.3.5 樣品中鄰苯二甲酸含量測定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 丹參樣品中鄰苯二甲酸酯類成分分析
        3.2 PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)立枯絲核菌
        3.3 PDB培養(yǎng)基培養(yǎng)立枯絲核菌
        3.4 PDB培養(yǎng)基中立枯絲核菌代謝物分析
    4 小結(jié)
第三章 鄰苯二甲酸與立枯絲核菌共培養(yǎng)體系對丹參生理特性的影響
    1 材料與儀器
        1.1 材料
        1.2 試劑
        1.3 Hoagland營養(yǎng)液
        1.4 儀器
    2 方法
        2.1 丹參種苗的培養(yǎng)
        2.2 水培丹參生物量
        2.3 水培丹參SOD活性
        2.4 水培丹參POD活性
        2.5 水培丹參MDA含量
    3 結(jié)果與分析
        3.1 水培丹參生物量
        3.2 丹參SOD、POD活性與MDA含量
    4 小結(jié)
第四章 鄰苯二甲酸介導立枯絲核菌共培養(yǎng)體系對丹參葉片Unigene表達的影響
    1 樣品的收集和準備
        1.1 RNA的提取與檢驗
        1.2 文庫的構(gòu)建與質(zhì)檢
        1.3 上機測序
    2 數(shù)據(jù)分析
        2.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)質(zhì)量分析
        2.2 轉(zhuǎn)錄本的拼接及Corset層次聚類
        2.3 轉(zhuǎn)錄本質(zhì)量評估
    3 結(jié)果
        3.1 不同處理下丹參葉片差異表達基因GO分類及富集分析
        3.2 不同處理下丹參葉片差異表達基因KEGG分類及富集分析
    4 討論
        4.1 植物病原菌互作信號通路
        4.2 鄰苯二甲酸與立枯絲核菌共培養(yǎng)體系脅迫對CML的影響
        4.3 鄰苯二甲酸與立枯絲核菌共培養(yǎng)體系脅迫對CNGCs的影響
    5 小結(jié)
第五章 鄰苯二甲酸介導立枯絲核菌共培養(yǎng)體系對丹參根部Unigene表達的影響
    1 樣品的收集和準備
        1.1 RNA的提取與檢驗
    2 數(shù)據(jù)分析
        2.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)質(zhì)量分析
    3 結(jié)果
        3.1 不同處理下丹參根部差異表達基因GO分類及富集分析
        3.2 不同處理下丹參根部差異表達基因KEGG分類及富集分析
            3.2.1 酚酸類化合物合成途徑
            3.2.2 木質(zhì)素合成途徑
    4 小結(jié)
第六章 結(jié)語
關于本研究的下一步思考
參考文獻
致謝
碩士期間發(fā)表論文



本文編號：3879128