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間甲酚降解菌的篩選及其代謝機(jī)理的研究

發(fā)布時間:2023-03-25 01:30
  酚類化合物是工業(yè)生產(chǎn)中的常用原料,這些物質(zhì)有高毒性和致癌性,一旦進(jìn)入自然環(huán)境中,會對水體和土壤造成嚴(yán)重污染,威脅到環(huán)境以及人類健康和安全。在甲酚的3個同分異構(gòu)體中,間甲酚是最難降解的物質(zhì),是焦化和印染廢水中常見的有機(jī)污染物,容易造成這些工業(yè)廢水難以被一般生物法處理。對于含酚廢水高效降解菌的篩選成為了近年來的研究熱點。本研究以間甲酚降解菌GEN05作為研究對象。通過菌株形態(tài)學(xué)分析和16S r RNA測序?qū)赀M(jìn)行鑒定:該菌株菌落呈現(xiàn)為直徑大小1~2 mm的白色半透明圓形狀態(tài);電鏡掃描發(fā)現(xiàn)該菌株為球狀菌,直徑為0.5~0.6μm;經(jīng)過16S r RNA測序鑒定,該菌為叢毛單胞菌屬,命名為Comamonas testosteroni GEN05。對該菌株的生長曲線進(jìn)行了測定,得出該菌株可以在16 h進(jìn)入對數(shù)期,56 h達(dá)到穩(wěn)定期。通過探究不同培養(yǎng)條件下菌株生長及其對間甲酚的降解性能,得出最佳培養(yǎng)條件為:接種量為5%,p H值為7,搖床轉(zhuǎn)速為180 r/min,溫度為30℃。探討了菌株降解間甲酚的濃度范圍,發(fā)現(xiàn)間甲酚對菌株生長著具有抑制作用,在2 m M長勢較好,而且該菌株能夠降解間甲酚的最大...

【文章頁數(shù)】:102 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
    1.1 間甲酚的廢水來源及其危害
        1.1.1 間甲酚廢水的來源
        1.1.2 間甲酚廢水的物化性質(zhì)和環(huán)境危害
    1.2 含酚廢水處理方法的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展
        1.2.1 物理方法
        1.2.2 化學(xué)方法
        1.2.3 生物方法
    1.3 間甲酚降解菌的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 間甲酚降解菌的種類及降解性能
        1.3.2 間甲酚代謝途徑的研究
    1.4 微生物反應(yīng)動力學(xué)
    1.5 微生物基因組學(xué)研究
        1.5.1 微生物功能基因組學(xué)研究
        1.5.2 微生物比較基因組學(xué)
    1.6 本課題的研究意義和內(nèi)容
        1.6.1 研究目的和意義
        1.6.2 主要內(nèi)容
2 間甲酚降解菌的篩選及鑒定
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基和主要試劑的配制
    2.2 分析方法
        2.2.1 間甲酚檢測方法
        2.2.2 菌體濃度的測定
    2.3 實驗方法
        2.3.1 樣品采集
        2.3.2 富集培養(yǎng)和馴化
        2.3.3 菌株的分離純化
        2.3.4 菌株的復(fù)篩
        2.3.5 菌株的形態(tài)分析
        2.3.6 菌株的分子生物學(xué)分析
    2.4 實驗結(jié)果與分析
        2.4.1 菌株的篩選結(jié)果
        2.4.2 菌株的形態(tài)特征
        2.4.3 菌株的分子生物學(xué)鑒定
    2.5 本章小結(jié)
3 菌株GEN05的間甲酚降解特性研究
    3.1 實驗材料
    3.2 分析方法
    3.3 實驗方法
        3.3.1 菌株生長曲線測定實驗方法
        3.3.2 培養(yǎng)條件的單因素探究方法
        3.3.3 間甲酚生物降解動力學(xué)研究
    3.4 實驗結(jié)果與分析
        3.4.1 菌株生長曲線測定
        3.4.2 接種量的影響
        3.4.3 培養(yǎng)基初始pH值的影響
        3.4.4 搖床轉(zhuǎn)速的影響
        3.4.5 溫度的影響
        3.4.6 不同初始濃度間甲酚的動力學(xué)
    3.5 本章小結(jié)
4 菌株的基因組測序及降解機(jī)理分析
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗儀器
        4.1.2 實驗試劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 基因組測序及生物信息學(xué)分析
        4.2.2 菌株降解間甲酚相關(guān)酶活性分析
        4.2.3 LC/MS檢測間甲酚代謝產(chǎn)物
    4.3 實驗結(jié)果與分析
        4.3.1 測序數(shù)據(jù)質(zhì)控及基因組組裝
        4.3.2 基因組組分分析
        4.3.3 全基因組的基因功能注釋
        4.3.4 比較基因組學(xué)分析
        4.3.5 菌株GEN05的間甲酚降解途徑及相關(guān)基因分析
        4.3.6 酶活性分析
        4.3.7 間甲酚代謝中間產(chǎn)物的LC/MS分析
    4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 全文總結(jié)
    5.2 不足與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 —攻讀碩士學(xué)位期間的成果



本文編號:3770257

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