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防治松褐天牛成蟲的白僵菌菌株室內(nèi)篩選和鑒定

發(fā)布時間:2022-12-06 03:41
  【目的】篩選對松褐天牛成蟲具有高致病力的白僵菌菌株,以期用于防治松褐天牛成蟲!痉椒ā渴占徊≡婢腥镜乃珊痔炫S紫x,25℃條件下PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)分離純化病原真菌。使用25℃、相對濕度60%、光周期16 L∶8D條件下羽化5~10天的健壯松褐天牛成蟲,生物測定病原真菌致死效果。將PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得的病原真菌孢子,分別溶于0.05%的吐溫80溶液中,配制成終濃度分別為1×10~6~3×10~6或者1×10~6~3×10~7個·mL-1的孢子懸浮液,0.05%的吐溫80溶液作為空白對照。采用涂枝法和噴灑法處理松褐天牛成蟲,以累計校正死亡率為指標評價菌株的致病力。折線圖由R包"ggplot2"繪制。采用ITS1和ITS4擴增真菌保守序列,經(jīng)連接轉(zhuǎn)化后測序。采用軟件muscle比對序列,MEGA軟件中的最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹!窘Y(jié)果】從感染的23頭松褐天牛幼蟲中共分離出23株白僵菌菌株,通過噴灑法初步篩選出18天累計校正死亡率在30%以上的6個菌株。選取B7和B92個產(chǎn)孢量大(14天,10~8·cm-2)的菌株,涂枝法進行毒力測試結(jié)果表明,B... 

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 供試昆蟲與菌株
    1.2 生物測定
    1.3 數(shù)據(jù)處理
    1.4 DNA提取、PCR擴增及連接轉(zhuǎn)化
    1.5 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
2 結(jié)果與分析
    2.1 菌株的分離純化和初步毒力測試
    2.2 菌株篩選和涂枝法毒力測試
    2.3 B9菌株噴灑法毒力測試
    2.4 菌株鑒定
3 討論
4 結(jié)論



本文編號:3710987

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