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一株拮抗釀酒葡萄灰霉病的枯草芽孢桿菌T3篩

發(fā)布時間:2023-11-12 17:19
  為篩選出對釀酒葡萄灰霉病具有良好抑制作用的拮抗菌,從釀酒葡萄根際土壤進行微生物分離,以灰葡萄孢(Botrytis cinerea)為靶標菌株,采用牛津杯法對拮抗菌進行篩選,通過形態(tài)學、生理生化特征以及16S rDNA進行鑒定分析,對拮抗菌進行生長特性及抑菌分析。結果表明:篩選出一株對灰葡萄孢(Botrytis cinerea)具有顯著抑制作用的T3菌株,經鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis),培養(yǎng)24~48 h T3菌株進入穩(wěn)定期,最適的生長溫度為37℃,最適pH為7.0。T3菌株對灰葡萄孢(Botrytis cinerea)MIC為3.6×105 CFU/mL,MBC為3.6×106 CFU/mL,3.6×109 CFU/mL T3菌株對灰葡萄孢(Botrytis cinerea)抑菌直徑為31.6±0.2 mm(P<0.05),抑菌效價為158.0±1.0 mm/mL(P<0.05)。掃描電鏡觀察T3菌株造成灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌絲畸形、扭曲、頂端膨大、原生質收...

【文章頁數】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 拮抗菌的篩選
            1.2.1.1 B. cinerea培養(yǎng)及孢子懸浮液制備
            1.2.1.2 拮抗菌的分離純化
            1.2.1.3 拮抗菌發(fā)酵液制備
            1.2.1.4 拮抗菌的篩選
        1.2.2 拮抗菌株的鑒定
            1.2.2.1 拮抗菌株形態(tài)觀察
            1.2.2.2 菌株生理生化鑒定
            1.2.2.3 16S rDNA分子生物學鑒定
        1.2.3 拮抗菌生長特性分析
            1.2.3.1 拮抗菌生長曲線繪制
            1.2.3.2 拮抗菌最適培養(yǎng)溫度測定
            1.2.3.3 拮抗菌最適pH測定
        1.2.4 B. cinerea拮抗菌抑菌作用初探
            1.2.4.1 拮抗菌對B.cinerea抑菌作用隨時間變化趨勢
            1.2.4.2 拮抗菌對B.cinerea MIC和MBC的測定
            1.2.4.3 不同濃度的拮抗菌株對B.cinerea抑制作用
            1.2.4.4 掃描電鏡觀察拮抗菌株對B.cinerea菌絲生長的影響
    1.3 數據處理
2 結果與分析
    2.1 拮抗菌的篩選結果
    2.2 拮抗菌的鑒定結果
        2.2.1 拮抗菌形態(tài)學鑒定結果
        2.2.2 拮抗菌生理生化鑒定結果
        2.2.3 拮抗菌16S rDNA序列分析
    2.3 拮抗菌生長特性結果
        2.3.1 拮抗菌生長曲線結果
        2.3.2 拮抗菌的最適生長溫度
        2.3.3 拮抗菌的最適pH
    2.4 拮抗菌對B. cinerea抑菌作用分析
        2.4.1 拮抗菌對B.cinerea抑菌作用隨時間變化趨勢
        2.4.2 拮抗菌對B.cinerea的MIC和MBC
        2.4.3 不同濃度的拮抗菌對B.cinerea抑制作用結果
        2.4.4 掃描電鏡觀察T3菌株對B.cinerea菌絲生長的影響
3 結論與討論



本文編號:3863597

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