Cry1B對(duì)鱗翅目和鞘翅目昆蟲(chóng)具有特異的殺蟲(chóng)活性,但是目前對(duì)其研究相對(duì)較少。不斷發(fā)掘新的Cry1B蛋白并研究其殺蟲(chóng)機(jī)制能夠?yàn)檗r(nóng)業(yè)害蟲(chóng)的生物防治提供依據(jù)。前期鑒定出一種新的cry1Bd基因,將其命名為newcry1Bd。首先,將new-Cry1Bd蛋白與其他Cry1B家族蛋白進(jìn)行親緣關(guān)系對(duì)比,確定其所屬分支,然后,把該基因克隆至pHT304載體,由cry1Ac基因啟動(dòng)子和終止子調(diào)控其在Bt菌株中的表達(dá);另外,為了研究new-Cry1Bd蛋白N端殺蟲(chóng)活性區(qū)域的表達(dá)穩(wěn)定性,把其N(xiāo)端編碼序列單獨(dú)克隆至pHT304中,構(gòu)建類(lèi)似的表達(dá)框架,用于蛋白表達(dá)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),new-Cry1Bd蛋白與Cry1Bd分支最為接近;序列比對(duì)結(jié)果顯示,new-Cry1Bd蛋白與Cry1Bd1蛋白僅相差3個(gè)氨基酸（S572、E1147和L1227）,其中,只有第一個(gè)差異位點(diǎn)位于N端活性區(qū)域,該蛋白及其N(xiāo)端部分（new-Cry1Bdhalf）均能在Bt菌株中表達(dá),但其表達(dá)產(chǎn)物的可溶性差異較大,約有1/2的new-Cry1Bd蛋白表達(dá)產(chǎn)物可以溶解于Na₂CO₃溶液,而大部分n... 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 氨基酸多序列比對(duì)構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)
        1.2.2 表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.3 2種蛋白的表達(dá)與可溶性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 new-Cry1Bd蛋白親緣關(guān)系分析
    2.2 載體的構(gòu)建及鑒定
    2.3 2個(gè)蛋白的表達(dá)和可溶性分析
3 結(jié)論與討論



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