通過單因素試驗(yàn)對(duì)枯草芽孢桿菌生物膜培養(yǎng)基成分(葡萄糖、Mg²⁺、Ca²⁺濃度)和培養(yǎng)環(huán)境（pH值、溫度）進(jìn)行篩選,在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)方案,探究枯草芽孢桿菌生物膜形成最優(yōu)條件.結(jié)果表明:LB培養(yǎng)基中含有12 g·L^-1葡萄糖、10 mmol·L^-1 Mg²⁺、1 mmol·L^-1 Ca²⁺,初始pH值為8.0（滅菌前）,25℃下培養(yǎng),為枯草芽孢桿菌生物膜形成的最優(yōu)條件,此時(shí)生物膜干重為0.167 9 g.與空白對(duì)照（純LB培養(yǎng)基）相比,生物膜干重提高了40%. 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,49(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

枯草芽孢桿菌生物膜形態(tài)

將培養(yǎng)基初始pH值調(diào)節(jié)為5.0,高壓滅菌后接種菌液,并分別向培養(yǎng)基中添加20 mmol·L-1 Mg2+溶液和20 mmol·L-1 Ca2+溶液,同時(shí)分別添加2、4、6、8、10、12 g·L-1過濾除菌的葡萄糖溶液,35 ℃下靜置培養(yǎng)1 d.結(jié)果表明:LB培養(yǎng)基添加葡萄糖后,生物膜形成能力逐步上升,當(dāng)葡萄糖濃度為6 g·L-1時(shí)生物膜干重最大;當(dāng)葡萄糖濃度進(jìn)一步提高時(shí),生物膜的形成能力逐漸下降,最后趨于平穩(wěn)(圖2E).2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

枯草芽孢桿菌生物膜的形成與其產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、多糖等胞外基質(zhì)濃度有關(guān)[18].據(jù)報(bào)道,葡萄糖相較于其他碳源對(duì)生物膜活性影響最顯著[19].本研究發(fā)現(xiàn),葡萄糖在低濃度(2～6 g·L-1)時(shí)對(duì)生物膜形成表現(xiàn)為促進(jìn)作用,但過多葡萄糖則起抑制作用.金屬離子Mg2+和Ca2+可影響細(xì)菌芽孢的形成[15],而枯草芽孢桿菌生物膜形成與其芽孢產(chǎn)生有關(guān)[20],因此Mg2+和Ca2+濃度能間接影響生物膜形成.據(jù)報(bào)道,適當(dāng)濃度Ca2+可加快許多微生物形成速度[21-22].本試驗(yàn)結(jié)果表明,低濃度(0.01～20 mmol·L-1)Ca2+對(duì)枯草芽孢桿菌生物膜形成表現(xiàn)為促進(jìn)作用,濃度大于20 mmol·L-1則表現(xiàn)為輕微抑制作用.與此類似,低濃度(1～20 mmol·L-1)Mg2+能夠提高生物膜形成能力,但當(dāng)其濃度大于20 mmol·L-1則會(huì)減弱生物膜形成能力.除了培養(yǎng)基成分會(huì)影響生物膜形成外,培養(yǎng)環(huán)境對(duì)其也有不同程度的影響.其中,pH值對(duì)生物膜形成的影響尤為顯著,弱酸性與中性環(huán)境中細(xì)菌形成最旺[23];過高或者過低的溫度都不利于生物膜形成.本研究在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),結(jié)果發(fā)現(xiàn):當(dāng)培養(yǎng)基中含12 g·L-1葡萄糖、10 mmol·L-1 Mg2+、1 mmol·L-1 Ca2+,且初始pH值為8.0,在25 ℃下培養(yǎng)時(shí),生物膜的形成能力最強(qiáng),此時(shí)生物膜干重為0.167 9 g,與空白對(duì)照相比,生物膜干重提高了40%.

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3453025