旨在建立一種碘量法,用于對(duì)多種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的快速篩查。以舒巴坦為基準(zhǔn)藥物,采用全波長掃描確定最佳測定波長,棋盤滴定法及單因素實(shí)驗(yàn)確定最佳工作條件,繪制舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過測定藥物的交叉反應(yīng)率,考察了該方法對(duì)4種常見β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的檢測靈敏度。結(jié)果顯示,最佳工作條件為測定波長585 nm、青霉素酶濃度1.0×10⁴ U/mL、青霉素G鉀濃度0.2 g/L、碘液濃度0.3 g/L、淀粉濃度1%、反應(yīng)pH6.0、反應(yīng)溫度37 ℃、孵育時(shí)間20 min、催化時(shí)間30 min;對(duì)舒巴坦的檢出限(LOD,IC₁₀)為410.13 μg/kg,半抑制濃度(IC₅₀)為2522.08 μg/kg,線性范圍(IC₂₀～I(xiàn)C₈₀)為801.79～7933.30 μg/kg;對(duì)克拉維酸、他唑巴坦、阿維巴坦的交叉反應(yīng)率分別為454.17%、574.30%、2319.79%,檢出限分別為224.64、67.56、42.86 μg/kg。該研究提供了碘量法檢測β-內(nèi)酰胺酶抑制劑體系的優(yōu)化方法,可...

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圖14種常用β-內(nèi)酰胺酶抑制劑化學(xué)結(jié)構(gòu)式

目前,我國僅出臺(tái)了進(jìn)出口動(dòng)物源食品中克拉維酸殘留的檢測方法(LC-MS/MS)[6],但其他β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法尚未出臺(tái)。目前,對(duì)于β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的檢測,主要集中于臨床醫(yī)療、藥物篩查以及食品安全領(lǐng)域的檢測,檢測方法主要為儀器分析法,包括高效液相色譜法(HPLC)、....

圖3青霉素酶及青霉素G鉀濃度對(duì)反應(yīng)體系的影響

表2不同青霉素酶及青霉素G鉀濃度對(duì)應(yīng)的吸光值和補(bǔ)償率%青霉素酶濃度/(×104U/mL)青霉素G鉀濃度/(g/L)0.050.10.150.20.250.3A陰性孔A陽性孔補(bǔ)償率A陰性孔A陽性孔補(bǔ)償率A陰性孔A陽性孔補(bǔ)償率A陰性孔A陽性孔....

圖6反應(yīng)溫度對(duì)反應(yīng)體系的影響

很多研究發(fā)現(xiàn),大部分β-內(nèi)酰胺酶在30～40℃下,催化活性較好[9]。溫度影響碘與淀粉的顯色,溫度過高碘與淀粉無法形成穩(wěn)定性結(jié)合,顯色變淺或不顯色;當(dāng)溫度低于30℃時(shí),體系正常顯色;40～50℃時(shí),顯色變淺;超過60℃時(shí),體系不顯色[12]。隨著溫度的升高,青霉素G鉀的自....

圖7孵育時(shí)間對(duì)反應(yīng)體系的影響

實(shí)驗(yàn)考察了孵育時(shí)間對(duì)檢測靈敏度的影響,結(jié)果見圖7。由圖7可知,孵育10min時(shí),數(shù)據(jù)平行性差,曲線擬合度差,相較其他3條曲線,曲線的上、下平臺(tái)均較高;孵育20、30、40min時(shí),3條曲線較為接近,擬合度好,差別不大。說明孵育時(shí)間超過20min,對(duì)檢測結(jié)果貢獻(xiàn)不大,為節(jié)約檢....

本文編號(hào)：3978240