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核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽的分離純化及穩(wěn)定性研究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-08 01:15
  采用5種商業(yè)蛋白酶水解核桃粕,評(píng)估水解物對(duì)二肽基肽酶4(DPP-Ⅳ)的抑制活性,優(yōu)選出堿性蛋白酶作為水解用酶。研究確定了堿性蛋白酶水解核桃粕的最佳水解時(shí)間為5 h,然后通過(guò)超濾和SP Sephadex C-25陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱層析分離純化堿性蛋白酶水解物得到核桃蛋白DPP-IV抑制肽,并對(duì)所得DPP-IV抑制肽的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性和模擬胃腸道消化穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)試。結(jié)果表明,核桃蛋白DPP-IV抑制肽(0.25 mg/mL)DPP-Ⅳ抑制率(76.19%)比未分離純化的水解物的提高了約3倍,其富含堿性氨基酸(含量34.36%),尤其是精氨酸含量高達(dá)25.93%。核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽在高溫(121℃)、極端pH(pH 1.0和pH 11.0)和模擬胃腸道消化條件下,均顯示出良好的穩(wěn)定性,因此可用作控制血糖的功能性食品成分。 

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 原料與試劑
        1.1.2 儀器與設(shè)備
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 核桃蛋白的酶法水解
        1.2.2 水解度的測(cè)定
        1.2.3 Tricine-SDS-PAGE分析
        1.2.4 DPP-Ⅳ抑制率的測(cè)定
        1.2.5 DPP-Ⅳ抑制肽的分離純化
            1.2.5.1 超濾
            1.2.5.2 陽(yáng)離子交換層析
        1.2.6 核桃蛋白DPP-Ⅳ抑制肽的穩(wěn)定性分析
            1.2.6.1 熱穩(wěn)定性
            1.2.6.2 pH穩(wěn)定性
            1.2.6.3 體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性
        1.2.7 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 核桃蛋白酶法水解條件的確定
        2.1.1 蛋白酶的篩選
        2.1.2 水解時(shí)間的選擇
    2.2 核桃蛋白DPP-IV抑制肽的分離純化
        2.2.1 超濾分離組分的DPP-Ⅳ抑制活性
        2.2.2 陽(yáng)離子交換層析各組分的DPP-IV抑制活性
    2.3 核桃蛋白DPP-IV抑制肽的穩(wěn)定性
        2.3.1 熱穩(wěn)定性(見(jiàn)圖6)
        2.3.2 pH穩(wěn)定性(見(jiàn)圖7)
        2.3.3 體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性(見(jiàn)圖8)
3 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大豆肽鈣螯合物的制備、穩(wěn)定性及表征[J]. 王俊強(qiáng),孔祥珍,華欲飛.  中國(guó)油脂. 2019(10)
[2]核桃肽生物活性的研究進(jìn)展[J]. 珠娜,李勇.  中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng). 2018(12)



本文編號(hào):3713246

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