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雄黃礦區(qū)微生物多樣性分析及砷氧化菌株的篩選與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-05-06 20:16
  隨著現(xiàn)在工業(yè)的迅速發(fā)展,環(huán)境污染的問題也越來越嚴(yán)重,特別是含砷金礦的開采,由于砷對(duì)人及其他生物的毒害,砷污染已經(jīng)是嚴(yán)重阻礙國民身體健康的關(guān)鍵,尋找一種快速,綠色的方法解決砷污染的問題是當(dāng)務(wù)之急。鑒于上述背景,本研究主要致力于研究如何更好的運(yùn)用生物學(xué)處理含砷廢水的問題。 湖南石門雄黃礦是一個(gè)具有1500年歷史的老礦,具有悠久的開采歷史。從該礦區(qū)尾礦堆積處積水、積水底層污泥表層及其地下400米處的礦坑水中取樣,分別命名為SY,NY和XY。對(duì)三個(gè)樣品利用ICP-MS進(jìn)行全元素分析后,利用變性梯度凝膠電泳(DGGE)和限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)技術(shù),對(duì)三個(gè)樣品的群落結(jié)構(gòu)及其多樣性進(jìn)行分析。為了獲得氧化As3+的混合菌群,利用含砷的培養(yǎng)基對(duì)樣品中的菌群進(jìn)行富集,多次傳代使菌群穩(wěn)定,并對(duì)三種混合菌群進(jìn)行砷耐受能力及氧化能力的測(cè)定。同時(shí)為了獲得氧化As3+的單菌,分別將混合菌種利用含砷的培養(yǎng)基富集,平板分離后,利用五價(jià)砷和硝酸銀的顏色反應(yīng),對(duì)單菌落的五價(jià)砷的氧化能力進(jìn)行檢測(cè),獲得可高效氧化As3+的菌株。最后利用獲得的可氧化As3+的混合菌群處理從華西集團(tuán)車河選礦廠取來的含砷廢水,檢測(cè)其處理效...

【文章頁數(shù)】:85 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 含砷礦產(chǎn)資源的廣泛分布
        1.1.2 砷及其化合物的危害
    1.2 群落多樣性的分析方法
        1.2.1 免疫學(xué)方法
        1.2.2 分子生物學(xué)方法
    1.3 含砷廢水的處理
        1.3.1 含砷廢水物理化學(xué)處理法
        1.3.2 含砷廢水的生物學(xué)處理
    1.4 研究目的、意義及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的和意義
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容
2 湖南石門雄黃礦區(qū)微生物多樣性分析
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 樣品來源
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 湖南石門雄黃礦區(qū)樣品預(yù)分析
            2.3.1.1 樣品預(yù)處理
            2.3.1.2 細(xì)菌基因組總DNA的提取
            2.3.1.3 16S rDNA V3區(qū)的擴(kuò)增
            2.3.1.4 變性梯度凝膠電泳檢測(cè)菌株的多樣性
        2.3.2 湖南石門雄黃礦區(qū)微生物多樣性分析
            2.3.2.1 細(xì)菌基因組總DNA的提取
            2.3.2.2 16S rDNA的擴(kuò)增及純化
            2.3.2.3 連接與轉(zhuǎn)化
            2.3.2.4 菌落PCR及雙酶切
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 樣品的物化結(jié)果分析
        2.4.2 變性梯度凝膠電泳分析結(jié)果
        2.4.3 16S rDNA的擴(kuò)增結(jié)果
        2.4.4 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析
        2.4.5 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        2.4.6 主成分分析(PCA)及典范對(duì)應(yīng)分析(CCA)
    2.5 本章小結(jié)
3 砷氧化菌株的篩選及相關(guān)基因的克隆
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 樣品來源
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 菌種的富集
        3.3.2 目的菌株的篩選
        3.3.3 目的菌株的鑒定
        3.3.4 單菌氧化能力的檢測(cè)
        3.3.5 氧化砷基因AoxB的克隆
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 菌種的篩選結(jié)果
        3.4.2 目的菌株的鑒定結(jié)果
        3.4.3 單菌砷氧化能力的檢測(cè)
        3.4.4 氧化砷基因AoxB的克隆
    3.5 本章小結(jié)
4 含砷廢水的生物處理
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 樣品來源
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 砷含量的測(cè)定
        4.3.2 砷標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定
        4.3.3 三價(jià)砷耐受能力的測(cè)定
        4.3.4 三價(jià)砷氧化能力的測(cè)定
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        4.4.2 菌群砷耐受程度的測(cè)定
        4.4.3 混菌的砷氧化能力測(cè)定
        4.4.4 車河選礦廠含砷廢水的處理
    4.5 本章小結(jié)
5 結(jié)論和展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間研究成果
致謝



本文編號(hào):3966289

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