白腐真菌能夠有效地吸附廢水中的重金屬，但在去除重金屬的同時需抵御重金屬對自身的毒害。蛋白質參與了細胞代謝、增殖、轉錄、信號傳導等眾多生命活動，并且白腐真菌胞外培養(yǎng)液蛋白與重金屬結晶的形成密切相關，從蛋白質水平上分析能夠進一步了解白腐真菌對重金屬毒害的調節(jié)機制及與重金屬之間的相互作用。目前有關胞外培養(yǎng)液中蛋白質的變化與重金屬誘導的關系還未有詳細研究。本論文考察了白腐真菌(Phanerochaete chrysosporium)在Cd(Ⅱ)誘導下合適的培養(yǎng)液蛋白提取時間，并對差異蛋白沉淀提取、雙向電泳分離和質譜鑒定，最后搜庫比對得到鑒定成功的蛋白，結合蛋白的功能分析黃孢原毛平革菌對Cd(Ⅱ)毒害的調節(jié)機制。 通過考察黃孢原毛平革菌在對數(shù)生長期50⁷0h內對Cd(Ⅱ)的去除情況，發(fā)現(xiàn)在65h時對重金屬Cd(Ⅱ)有最大吸附量為77.14mg/g，而且黃孢原毛平革菌培養(yǎng)液中蛋白質在60⁷0h的時間段內含量較多，因此選取65h作為蛋白質的提取時間，此時Cd(Ⅱ)吸附量最大，更能直接有效地反映黃孢原毛平革菌與重金屬之間的相互作用。 通過單相電泳(SDS-P...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 重金屬廢水污染概述
        1.1.1 重金屬廢水污染的特點
        1.1.2 我國重金屬廢水污染現(xiàn)狀
        1.1.3 重金屬污染的毒害
        1.1.4 重金屬廢水的處理特點
    1.2 微生物處理重金屬廢水
        1.2.1 微生物處理法的定義
        1.2.2 微生物處理重金屬廢水的機理
        1.2.3 常用的微生物處理法
        1.2.4 微生物處理法與其他方法的比較
    1.3 白腐真菌與重金屬廢水的治理
        1.3.1 白腐真菌對重金屬的吸附
        1.3.2 重金屬對白腐真菌的影響
    1.4 白腐真菌蛋白質及電泳分析
        1.4.1 蛋白質的相關分析
        1.4.2 蛋白質樣品的制備
        1.4.3 蛋白質電泳分析
        1.4.4 生物質譜技術和蛋白質鑒定
    1.5 本課題的研究內容和意義
第2章 白腐真菌對Cd(Ⅱ)的吸附及培養(yǎng)液中蛋白的提取
    2.1 實驗主要儀器和試劑
        2.1.1 實驗主要儀器
        2.1.2 實驗主要試劑及其制備
    2.2 實驗材料
        2.2.1 菌種
        2.2.2 菌種的傳代培養(yǎng)
        2.2.3 菌絲球的培養(yǎng)
    2.3 Cd(Ⅱ)濃度的測定
    2.4 實驗方法
        2.4.1 Cd(Ⅱ)的吸附實驗
        2.4.2 溶液pH值的測定
        2.4.3 Bradford法測定蛋白質含量
        2.4.4 培養(yǎng)液中蛋白質的提取
    2.5 結果與討論
        2.5.1 Cd(Ⅱ)的吸附實驗
        2.5.2 溶液pH值的變化
        2.5.3 蛋白質含量的變化
    2.6 結論
第3章 Cd(Ⅱ)誘導白腐真菌培養(yǎng)液蛋白的單向及雙向電泳
    3.1 實驗主要儀器和試劑
        3.1.1 實驗主要儀器
        3.1.2 單向電泳實驗主要試劑及其制備
        3.1.3 雙向電泳實驗主要試劑及其制備
    3.2 實驗材料
        3.2.1 菌種
        3.2.2 菌絲球的培養(yǎng)
        3.2.3 蛋白樣品的制備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 單相電泳凝膠的配制
        3.3.2 單相電泳凝膠的染色及褪色
        3.3.3 雙向電泳樣品的前處理
        3.3.4 雙向電泳試劑盒測定蛋白質含量
        3.3.5 雙向電泳樣品染色標記處理
        3.3.6 雙向電泳的第一向電泳
        3.3.7 雙向電泳的第二向電泳
        3.3.8 雙向電泳膠條的平衡和轉移
        3.3.9 雙向電泳凝膠固定、染色和脫色
    3.4 結果與討論
        3.4.1 單向電泳的實驗結果
        3.4.2 雙向電泳的實驗結果
    3.5 結論
第4章 Cd(Ⅱ)誘導白腐真菌培養(yǎng)液蛋白的質譜鑒定
    4.1 實驗主要儀器和試劑
        4.1.1 實驗主要儀器
        4.1.2 實驗主要試劑及其制備
    4.2 實驗材料
    4.3 實驗方法
        4.3.1 蛋白點的酶解
        4.3.2 MALDI-TOF/TOF質譜鑒定
    4.4 結果與討論
    4.5 結論
結論
    1 研究結論
    2 研究展望
參考文獻
致謝
附錄A 攻讀碩士學位期間所發(fā)表的學術論文目錄
附錄B 攻讀碩士學位期間所申請的國家發(fā)明專利目錄



本文編號：3747876