通過3,5-二硝基水楊酸（DNS）和對(duì)硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG）比色法,研究對(duì)比堿法和水溶預(yù)處理桉木得到的兩種不同木質(zhì)素對(duì)不同酶蛋白（纖維素酶、聚木糖酶和β-葡萄糖苷酶）的吸附和脫附影響差異,以及木質(zhì)素吸附對(duì)不同酶蛋白活性的抑制影響。兩種木質(zhì)素對(duì)不同酶蛋白吸附實(shí)驗(yàn)表明,溫度對(duì)堿木質(zhì)素吸附酶蛋白能力的影響大于二甲苯磺酸鈉（SXS）木質(zhì)素,被吸附的酶蛋白更容易從SXS木質(zhì)素上脫附下來;木質(zhì)素吸附會(huì)顯著降低酶活,升高溫度可以提高木質(zhì)素對(duì)酶蛋白的吸附能力,但會(huì)抑制酶活。 

【文章來源】：中國造紙學(xué)報(bào). 2020,35(04)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

不同木質(zhì)素對(duì)3種酶蛋白的吸附百分比

根據(jù)2.1中兩種木質(zhì)素的酶蛋白吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將吸附了酶蛋白（吸附條件：時(shí)間4 h、50℃）的堿木質(zhì)素和SXS木質(zhì)素過濾干燥后置于pH值=10的緩沖液中，同樣在50℃下反應(yīng)4 h，研究其脫附行為，結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，兩種木質(zhì)素對(duì)3種酶蛋白的脫附能力強(qiáng)弱順序均為β-葡萄糖苷酶>纖維素酶>聚木糖酶，且SXS木質(zhì)素對(duì)3種酶蛋白的脫附效果均比堿木質(zhì)素好；相同脫附條件下，堿木質(zhì)素脫附了42.0%的纖維素酶，26.6%的聚木糖酶和44.5%的β-葡萄糖苷酶，而SXS木質(zhì)素脫附了61.4%的纖維素酶，32.7%的聚木糖酶和64.6%的β-葡萄糖苷酶。由此可知，堿木質(zhì)素對(duì)酶蛋白的吸附要強(qiáng)于SXS木質(zhì)素，SXS木質(zhì)素則更容易實(shí)現(xiàn)對(duì)酶蛋白的脫附。

將兩種木質(zhì)素置于5 mL的酶（酶濃度10%）中吸附4 h后，測定溶液中游離酶的酶活，結(jié)果如圖3所示。由圖3可知，在室溫和50℃條件下，兩種木質(zhì)素對(duì)3種酶蛋白的吸附均降低了酶活，且50℃時(shí)，各酶蛋白的酶活下降更多。兩種木質(zhì)素的吸附都明顯降低了3種酶的酶活，不同酶的酶活下降百分比如圖4所示。由圖1可知，堿木質(zhì)素對(duì)纖維素酶的最大吸附百分比不超過12%，但其酶活在室溫和50℃條件下分別下降了8.6%和15.3%（見圖3(a））；而SXS木質(zhì)素對(duì)纖維素酶的最大吸附百分比小于5%，卻導(dǎo)致其酶活分別下降了25.8%（室溫）和32.7%(50℃）。在室溫和50℃下，堿木質(zhì)素對(duì)聚木糖酶的最大吸附百分比分別為40.4%和59.5%，而對(duì)應(yīng)的酶活下降了19.9%和33.8%（見圖4）；而相同條件下，SXS木質(zhì)素對(duì)聚木糖酶的最大吸附百分比分別為29.8%和39.7%，而對(duì)應(yīng)酶活卻均下降了約65%。但對(duì)β-葡萄糖苷酶而言，卻存在堿木質(zhì)素對(duì)其吸附量多，但其酶活下降少的現(xiàn)象。結(jié)合姚蘭等[4]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，這可能是由于SXS木質(zhì)素中一些可溶的小分子質(zhì)量降解產(chǎn)物對(duì)酶的活力具有抑制作用或使其失去活性，從而使酶活降低。不同酶組分生物化學(xué)特性不同，且不同木質(zhì)素的物理化學(xué)性質(zhì)對(duì)不同酶組分的影響差異較大，在以后的工作中需要更深入的研究。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3432455