應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記研究崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系
發(fā)布時(shí)間:2017-10-06 01:11
本文關(guān)鍵詞:應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記研究崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系
更多相關(guān)文章: 崇州枇杷茶 滎經(jīng)枇杷茶 ISSR 遺傳多樣性 親緣關(guān)系
【摘要】:崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶是我省重要的野生大茶樹資源。為了解崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源的基本形態(tài)特征和遺傳多樣性與親緣關(guān)系,本試驗(yàn)收集了崇州枇杷茶材料45份、滎經(jīng)枇杷茶材料22份及福鼎大白茶、龍井43等8份材料,共計(jì)75份種質(zhì)資源作供試材料。對(duì)67份崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶的供試材料的生物學(xué)特性進(jìn)行了初步觀察描述,再采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)全部供試材料進(jìn)行了遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析,試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶的外部形態(tài)既相似,也有一定差別。崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶的樹型均以喬木和小喬木為主,含有少量灌木;葉面積較大,為大葉或特大葉,葉色呈綠色或深綠色,鋸齒銳度中偏鈍,深度中偏淺,密度中偏稀,葉尖以漸尖或急尖為主。茶花的萼片顏色呈綠色,萼片數(shù)為5枚左右,萼片無茸毛較多,花瓣顏色多呈白色,花瓣數(shù)7~11枚,花冠直徑中偏大,子房大多數(shù)無茸毛,柱頭開裂數(shù)為3-4裂,多為淺裂或中裂。枇杷茶外部形態(tài)的主要差異表現(xiàn)為:崇州枇杷茶萼片數(shù)為5-6枚,滎經(jīng)枇杷茶萼片數(shù)為4-5枚;崇州枇杷茶花冠直徑為3.18~5.85cm之間,滎經(jīng)枇杷茶為3.54~5.65cm之間;花瓣質(zhì)地上,崇州枇杷茶屬于中偏薄,而滎經(jīng)枇杷茶屬于中偏厚。同時(shí),根據(jù)對(duì)供試材料的觀測(cè),并參照張宏達(dá)分類系統(tǒng)分類方法進(jìn)行分析,結(jié)果表明,崇州枇杷茶含有禿房茶、毛葉茶,而滎經(jīng)枇杷茶則含有白毛茶、毛葉茶。而根據(jù)陳亮茶樹分類系統(tǒng)分類,崇州枇杷茶則屬于禿房茶與茶系,其中含有禿房茶和白毛茶;而滎經(jīng)枇杷茶亦屬于禿房茶和茶系,茶系中又含有普洱茶和白毛茶。崇州枇杷茶在形態(tài)多樣性上優(yōu)于滎經(jīng)枇杷茶。(2)從預(yù)選的60條ISSR引物中篩選得到出14條多態(tài)性高的引物,篩選出的引物對(duì)各個(gè)樣品進(jìn)行ISSP-PCR擴(kuò)增,可以獲得清晰的擴(kuò)增條帶,而且多態(tài)性豐富。14條引物共擴(kuò)增出239條清晰可重復(fù)的條帶,其中有209條為多態(tài)性條帶,多態(tài)性位點(diǎn)百分率為86.67%。每個(gè)引物擴(kuò)增的條帶為12~23,平均擴(kuò)增條帶數(shù)為17.07條。(3)根據(jù)ISSR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果,利用Nei's的方法計(jì)算出45份崇州枇杷茶供試材料之間的遺傳相似系數(shù)的變異范圍為0.594~0.858之間,其中C34與C38的遺傳相似系數(shù)最近,為0.594,而C42與C23的遺傳相似系數(shù)最遠(yuǎn),為0.858。根據(jù)遺傳相似系數(shù)按照UPGMA法進(jìn)行聚類,由圖可知,當(dāng)GS值為0.705時(shí),可將崇州枇杷茶分為6大類。(4)根據(jù)ISSR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果,利用Nei's的方法計(jì)算出22份滎經(jīng)枇杷茶供試材料間的遺傳相似系數(shù)GS值在0.598~0.774之間。其中,Y14與Y18的GS值最大,為0.774,遺傳關(guān)系最近。而GS值最小的是Y16與Y4,GS值為0.598,表明它們的親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。根據(jù)遺傳相似系數(shù)按照UPGMA法進(jìn)行聚類,由圖可知,當(dāng)遺傳相似系數(shù)為0.703時(shí),可將22份滎經(jīng)枇杷茶分為五大類。(5)通過對(duì)75份供試材料進(jìn)行聚類分析,結(jié)果表明,各材料之間的遺傳相似系數(shù)在0.552~0.857之間。當(dāng)GS值為0.650時(shí),供試材料可分為2個(gè)大類群。當(dāng)GS值為0.688時(shí),67份枇杷茶可分為6個(gè)亞群。崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶與福鼎大白茶、龍井43等品種遺傳距離均較遠(yuǎn),且形態(tài)特征上也具有明顯的區(qū)別。研究結(jié)果表明:滎經(jīng)枇杷茶比崇州枇杷茶野生大茶樹進(jìn)化程度更高。部分枇杷茶在系統(tǒng)發(fā)育過程中,與當(dāng)?shù)仄渌铇滟Y源進(jìn)行了基因交流,從而導(dǎo)致個(gè)別的崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶野生大茶樹向四川中小葉群體種等地方茶樹資源轉(zhuǎn)化。
【關(guān)鍵詞】:崇州枇杷茶 滎經(jīng)枇杷茶 ISSR 遺傳多樣性 親緣關(guān)系
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S571.1
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstracts6-9
- 縮略詞表9-12
- 1 文獻(xiàn)綜述12-22
- 1.1 茶樹種質(zhì)資源概括12-13
- 1.1.1 國(guó)內(nèi)外茶樹種質(zhì)資源的收集與保存12-13
- 1.1.2 四川茶樹種質(zhì)資源概述13
- 1.1.3 崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶簡(jiǎn)介13
- 1.2 茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性和親緣關(guān)系的研究意義13-14
- 1.2.1 茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究意義13-14
- 1.2.2 茶樹種質(zhì)資源親緣關(guān)系14
- 1.3 茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性和親緣關(guān)系的研究方法及概述14-19
- 1.3.1 傳統(tǒng)研究標(biāo)記分類方法14-17
- 1.3.2 DNA分子標(biāo)記法17-19
- 1.4 ISSR分子標(biāo)記的研究現(xiàn)狀及趨勢(shì)19-21
- 1.4.1 ISSR分子標(biāo)記的簡(jiǎn)介19
- 1.4.2 ISSR分子標(biāo)記在茶樹上的應(yīng)用19-21
- 1.5 立題背景及意義21
- 1.6 技術(shù)路線21-22
- 2 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶的形態(tài)學(xué)分析22-32
- 2.1 材料與方法22-23
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備22
- 2.1.2 供試材料22
- 2.1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法22-23
- 2.2 結(jié)果分析23-32
- 2.2.1 供試枇杷茶種質(zhì)資源的基本情況23-24
- 2.2.2 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶野生大茶樹的基本形態(tài)特征及植物學(xué)分類24-30
- 2.2.3 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶野生大茶樹種質(zhì)資源性狀比較與相關(guān)性30-32
- 3 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶遺傳多樣性的ISSR分析32-45
- 3.1 材料與方法32
- 3.1.1 供試材料32
- 3.2 主要試劑與器材32-37
- 3.2.1 試劑準(zhǔn)備32-33
- 3.2.2 主要儀器33-34
- 3.2.3 茶樹DNA提取及檢測(cè)34-35
- 3.2.4 引物篩選35-36
- 3.2.5 ISSR反應(yīng)體系建立36
- 3.2.6 ISSR擴(kuò)增36
- 3.2.7 ISSR數(shù)據(jù)以及形態(tài)統(tǒng)計(jì)分析36-37
- 3.3 結(jié)果與分析37-45
- 3.3.1 DNA的提取與檢測(cè)37-38
- 3.3.2 ISSR擴(kuò)增程序38
- 3.3.3 ISSR-PCR擴(kuò)增引物退火溫度篩選及多態(tài)性分析38-39
- 3.3.4 供試材料的ISSR擴(kuò)增結(jié)果39-40
- 3.3.5 遺傳多樣性與聚類分析40-42
- 3.3.6 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶聚類分析42-45
- 4 結(jié)論與討論45-48
- 4.1 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶形態(tài)特征的相關(guān)性45
- 4.2 ISSR分子標(biāo)記反應(yīng)體系的建立45
- 4.3 ISSR分子標(biāo)記與茶樹形態(tài)特征的相關(guān)性45-46
- 4.4 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶的遺傳多樣性分析46-47
- 4.5 崇州枇杷茶與滎經(jīng)枇杷茶野生大茶樹的親緣關(guān)系47-48
- 5 研究展望48-49
- 參考文獻(xiàn)49-53
- 致謝53
【相似文獻(xiàn)】
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1 唐建敏;郭雅丹;汪婷;曾艷;唐茜;;滎經(jīng)枇杷茶野生大茶樹主要品質(zhì)生化成分研究[J];四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年04期
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1 黃福濤;應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記研究崇州枇杷茶和滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
2 唐建敏;野生滎經(jīng)枇杷茶種質(zhì)資源的調(diào)查研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年
,本文編號(hào):979863
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