本文關(guān)鍵詞：葉酸對中期草魚生長和腸道免疫的影響及其調(diào)控機制研究

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【摘要】：本試驗旨在研究飼糧添加不同水平葉酸對生長中期草魚生長性能、腸道免疫能力、緊密連接和抗氧化能力的影響及其作用機制。將初始體重為267.69±0.87 g的體格均勻、健康的草魚隨機分配到18個網(wǎng)箱中,設(shè)置6個葉酸水平,各組間初始體重差異不顯著(P0.05),進(jìn)行8周的動物實驗,實驗期間各處理分別投喂葉酸含量為0.10(對照組)、0.47、1.03、1.48、1.88和3.12mg/kg的飼糧。本研究結(jié)果顯示：飼糧中適宜水平的葉酸顯著提高中期草魚的末重、增重百分比(PWG)、特異性增長率、攝食量和飼料效率(P0.05)。適宜水平葉酸顯著提高草魚腸道胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性、Na+/K+-ATP酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶(CK)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性(P0.05),同時,適宜水平葉酸上調(diào)前腸、中腸和后腸CK和Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 1基因表達(dá)(P0.05),但是對腸道Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 8基因表達(dá)無影響(P0.05)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),適宜水平葉酸上調(diào)腸道雷帕霉素靶蛋白和S6蛋白激酶1基因表達(dá),但是下調(diào)草魚腸道e1F4E結(jié)合蛋白基因表達(dá)(P0.05)。此外,適宜水平葉酸顯著增加草魚腸道酸性磷酸酶和溶菌酶活性以及補體C3的含量；顯著下調(diào)草魚腸道促炎細(xì)胞因子白介素1β、白介素8、腫瘤壞死因子α、信號分子核因子κBp65、IκB激酶(IKK) α、 IKK-β和IKK-γ的基因表達(dá)(P0.05)；顯著上調(diào)腸道抗炎細(xì)胞因子白介素10、轉(zhuǎn)化生長因子β和核因子κB抑制蛋白(IκB)的基因表達(dá)(P0.05)。同時,適宜水平葉酸顯著上調(diào)occludin、ZO-1和claudin-b在草魚腸道的基因表達(dá)(P0.05),顯著下調(diào)claudin-15、肌球蛋白輕鏈激酶和p38絲裂原活化蛋白激酶在草魚腸道的基因表達(dá)(P0.05)。同時本試驗研究發(fā)現(xiàn),適宜水平葉酸降低草魚腸道的氧自由基、丙二醛和蛋白羰基的含量(P0.05),顯著增加腸道還原型谷胱甘肽的含量以及銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)和谷胱甘肽還原酶(GR)的活性,顯著降低腸道錳超氧化物歧化酶(MnSOD)活性(P0.05)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),適宜水平葉酸顯著上調(diào)草魚腸道Cu/ZnSOD、CAT、GPx、GST、GR和核因子相關(guān)因子2基因表達(dá),下調(diào)腸道MnSOD. Kelch樣ECH聯(lián)合蛋白1a (Keap1a)和Keap1b基因表達(dá)(P0.05)。在本試驗條件下,以PWG為標(biāo)識,確定中期草魚(267-747 g)飼糧的葉酸需要量為1.60mg/kg飼糧。
【關(guān)鍵詞】：草魚 葉酸 消化吸收能力 免疫力 緊密連接 抗氧化能力
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S965.112
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 符號說明7-11
• 1 選題背景11-12
• 2 文獻(xiàn)綜述12-17
• 2.1 葉酸對魚類生長性能的影響12-13
• 2.1.1 葉酸對魚類腸道生長發(fā)育的影響12
• 2.1.2 葉酸對魚類腸道消化酶和刷狀緣酶的影響12-13
• 2.2 葉酸對魚類腸道免疫屏障功能和物理屏障功能的影響13-16
• 2.2.1 葉酸對魚類腸道免疫功能的影響14
• 2.2.2 葉酸對魚類腸道緊密連接的影響14-15
• 2.2.3 葉酸對魚類腸道抗氧化能力的影響15
• 2.2.4 葉酸對魚類抗氧化酶基因表達(dá)及相關(guān)通路信號分子的影響15-16
• 2.3 水生動物葉酸需要量16
• 2.4 存在問題16-17
• 3. 研究目的和意義17-18
• 3.1 研究目的17
• 3.2 研究意義17-18
• 4 試驗方案18-25
• 4.1 試驗設(shè)計18
• 4.2 飼糧配方及主要營養(yǎng)指標(biāo)18
• 4.3 試驗條件及飼養(yǎng)管理18-19
• 4.4 測定指標(biāo)19-23
• 4.4.1 樣品采集19-20
• 4.4.2 指標(biāo)測定20
• 4.4.3 實時熒光定量PCR20-23
• 4.5 計算公式與數(shù)據(jù)分析23-25
• 5 試驗結(jié)果25-44
• 5.1 葉酸對草魚生長性能的影響25-26
• 5.2 葉酸對草魚腸道發(fā)育的影響26-27
• 5.3 葉酸對草魚消化酶和刷狀緣酶活性的影響27-30
• 5.4 葉酸對草魚IGF-1含量的影響30-31
• 5.5 葉酸對草魚消化酶和刷狀緣酶基因表達(dá)的影響31-33
• 5.6 葉酸對草魚TOR信號通路表達(dá)的影響33-34
• 5.7 葉酸對草魚腸道免疫指標(biāo)的影響34-38
• 5.8 葉酸對草魚腸道緊密連接蛋白的影響38-41
• 5.9 葉酸對草魚腸道抗氧化指標(biāo)的影響41-44
• 6 討論44-54
• 6.1 葉酸對中期草魚生長性能的影響44-48
• 6.1.1 葉酸對中期草魚體重、攝食量及飼料效率的影響44
• 6.1.2 葉酸對中期草魚消化酶和刷狀緣酶活性的影響44-45
• 6.1.3 葉酸對中期草魚腸道刷狀緣基因表達(dá)的影響45-46
• 6.1.4 葉酸可能通過TOR信號通路調(diào)節(jié)刷狀緣酶基因表達(dá)46-48
• 6.2 葉酸對中期草魚腸道健康的影響48-53
• 6.2.1 葉酸對中期草魚腸道抗菌物質(zhì)的影響48
• 6.2.2 葉酸對中期草魚腸道炎癥反應(yīng)及相關(guān)的信號分子的影響48-50
• 6.2.3 葉酸對中期草魚腸道緊密連接蛋白基因表達(dá)及其相關(guān)分子的影響50-51
• 6.2.4 葉酸對中期草魚腸道非酶性和酶性抗氧化能力的影響51-52
• 6.2.5 葉酸對中期草魚腸道抗氧化酶基因表達(dá)及相關(guān)信號分子的影響52-53
• 6.3 中期草魚的葉酸需要量53-54
• 7 結(jié)論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-66
• 致謝66-68
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄68

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本文編號：768262